目的研究CD40配体(CD40L,CD154)对CD40阴性肺癌细胞系转染CD40 cDNA后(即CD40高表达细胞系)的调节作用,评价CD40作为治疗靶抗原的潜能.方法通过流式细胞术筛选CD40阴性细胞系,即GLC-82细胞.以3D5细胞为模板,以pCDNA3为载体,通过基因克隆技术制备CD40 cDNA并转染到GLG-82细胞中,建立CD40高表达细胞系,即GLC-82/CD40.在细胞培养液中加入0.1μg/mlCD40L,通过流式细胞术和MTT试验检测CD40L对细胞表型、细胞生长、细胞周期及凋亡的影响.结果Western蛋白印迹检测、限制性酶切电泳、DNA测序和流式细胞仪测定均证明了CD40cDNA转染成功,转染后细胞的CD40表达率高达95.9
作者：崔巍；李龙芸
来源：中华肿瘤杂志 2004 年 26卷 3期
