目的探讨泰素耐药相关基因(TRAG)-3来源的细胞毒性T淋巴细胞(CTL)表位负载树突状细胞疫苗的体外免疫效应,为临床开展基于TRAG-3表位的特异性免疫治疗奠定基础.方法采用标准Fmoc方案合成表位肽,以反相高压液相色谱仪(RP-HPLC)纯化、分析多肽,质谱鉴定多肽;从外周血单个核细胞(PBMC)分离培养树突状细胞(DC),应用相差显微镜和电镜从形态学上鉴定DC,采用流式细胞仪(FACS)分析DC表型;将TRAG-3 CTL表位肽(50 μg/ml)负载的DC体外刺激PBMC 3周,应用 51Cr释放分析检测效应细胞CTL活性,同时应用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测效应细胞IFN-γ的分泌.结果 Fmoc方案合成的表位肽纯度>90
作者:朱波;陈正堂;程晓明;吴玉章
来源:中华肿瘤杂志 2004 年 26卷 12期