目的 检测胃癌MKN45细胞周期基因表达谱的变化,从基因组学角度阐明胃癌细胞增殖的机制.方法 应用双胸腺嘧啶核苷法和胸腺嘧啶核苷-偌考达唑法,分别阻断胃癌细胞株MKN45于G2/M和G1/S交界点后释放;流式细胞仪监测细胞同步化程度;cDNA基因芯片检测细胞周期中G2/M交界点、M/G1过渡期、G1早期、G1晚期、G1/S交界点、S早期、S晚期、G2早期和G2末期的基因表达谱,专业软件进行聚类分析;借助基因数据库,重点对MKN45细胞周期G1末期及G2期上调基因表达进行分析.定量PCR测定cyclin E、cyclin B、plk1、STK15基因在上述9个时间点的mRNA水平变化.结果 分析基因芯片检测,得到9个时间点均可信的2001个基因,其中959个基因出现改变(上调或下调),在G1末期或G2期上调基因379个,S期和M期上调基因40个(与G1末期和G2期上调基因重合),在G1末期上调基因中,功能主要涉及DNA代谢、转录与翻译、蛋白质转运、泛素化和信号转导等;G2期上调基因主要涉及RNA合成与加工、蛋白质转运、细胞骨架合成、凋亡与抑凋亡、转录调节、泛素化、信号转导、有丝分裂调节以及癌基因的表达等.定量PCR检测4个基因的mRNA水平变化趋势,与基因芯片检测结果基本一致.结论 在MKN45细胞周期演进中,DNA复制及染色体分离所需的各种物质准备分别在G1末期及G2期完成,
作者：兰斌；刘炳亚；陈雪华；张济；王侃侃；朱正纲
来源：中华肿瘤杂志 2006 年 28卷 8期
