目的 建立西妥昔单抗耐药的人鼻咽癌细胞系5-8F/Erbitux,初步探讨胰岛素样生长因子1受体(IGF-1R)信号通路与西妥昔单抗在鼻咽癌耐药机制中的关系.方法 以表皮生长因子受体(EGFR)高表达且西妥昔单抗抑制率较高的人鼻咽癌5-8F细胞株为研究对象,采用逐步增加剂量法诱导建立西妥昔单抗耐药细胞5-8F/Erbitux.采用四甲基偶氮唑蓝(MTr)法检测西妥昔单抗对5-8F/Erbitux细胞的半数抑制浓度(IC50),计算耐药指数(RI).计数法描绘5-8F/Erbitux和5-8F细胞的生长曲线,计算倍增时间(TD).以流式细胞仪检测5-8F/Erbitux和5-8F细胞的细胞周期.采用MTT法检测5-8F/Erbitux细胞对5-氟尿嘧啶(5-Fu)、顺铂(DDP)及紫杉醇(TAX)的交叉耐药谱.采用Western blot法检测5-8F/Erbitux和5-8F细胞中P糖蛋白(P-gp)、IGF-1R及磷酸化IGF-1R(p-IGF1R)的表达.采用实时荧光定量PCR法检测5-8F/Erbitux和5-8F细胞中多药耐药基因(MDR1)的表达量.结果 成功建立西妥昔单抗耐药的人鼻咽癌细胞系5-8F/Erbitux,西妥昔单抗作用3 d和5 d时的RI分别为1.2和1.1.5-8F和5-8F/Erbitux细胞的TD分别为26.63 h和142.30 h.与5-8F细胞比较,5-8F/Erbitux细胞中G0/G1期比例显著增高(P＜0.001),S期比例显著下降(P＜0.001).5-8F/Erbitux对5-Fu存在交叉耐药(RI=3.95,P＜0.01

作者：左强；罗荣城

来源：中华肿瘤杂志 2010 年 32卷 8期