目的 探讨RNA干扰H-ras基因对鼻咽癌细胞西妥昔单抗敏感性的影响.方法 采用逐步增加剂量法诱导建立西妥昔单抗耐药人鼻咽癌细胞系5-8F/Erbitux.Western blot法检测H-ras和K-ras蛋白的表达,实时荧光定量PCR检测H-ras和K-ras基因的表达量.构建靶向H-ras基因的shRNA真核表达载体,转染5-8F/Erbitux细胞,分别检测转染后5-8F/Erbitux细胞中H-ras蛋白及基因的表达以及对西妥昔单抗敏感性的改变.结果 西妥昔单抗作用3 d和5 d,5-8F/Erbitux细胞的耐药指数(RI)分别为1.2和1.1.5-8F/Erbitux细胞中,H-ras和K-ras蛋白表达水平分别为0.798±0.019和0.190±0.011,显著高于5-8F细胞(0.075±0.005和0.079±0.009,P＜0.001);5-8F/Erbitux细胞中,H-ras和K-ras基因表达量分别为1.260±0.114和0.850±0.006,与5-8F细胞比较,H-rqs基因表达量显著升高(P=0.016),K-ras基因表达量显著下降(P=0.000).H-ras-shRNA转染后,5-8F/Erbitux细胞中H-ras蛋白及基因表达均下降,细胞凋亡率及西妥昔单抗细胞增殖抑制率均显著升高(P＜0.001).结论 通过下调H-ras基因的表达可以逆转5-8F/Erbitux细胞对西妥昔单抗的耐药,5-8F/Erbitux细胞耐药性的产生与H-ras基因扩增与过表达有关.

作者：左强；罗荣城

来源：中华肿瘤杂志 2011 年 33卷 8期