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目的 探讨增殖诱导配体(APRIL)对结直肠癌细胞生长和转移的影响,以进一步明确APRIL在结直肠癌生物学行为中的作用.方法 APRIL基因的小干扰RNA质粒载体(APRIL-siRNA)转染人结直肠癌细胞SW480,重组人APRIL蛋白(rhAPRIL)刺激结直肠癌细胞HCT-116,采用CCK-8法检测细胞的增殖能力,流式细胞术检测细胞周期变化,Western blot检测细胞周期和凋亡调控蛋白cyclin D1、p21和Bcl-2的表达水平,Transwell小室侵袭和转移试验分析细胞侵袭及转移能力,逆转录聚合酶链反应检测基质金属蛋白酶2(MMP-2)和MMP-9 mRNA的表达变化.APRIL-siRNA转染的结直肠癌细胞SW480接种裸鼠,分析APRIL-siRNA对移植瘤生长和MMP表达的影响.结果 APRIL-siRNA组G0/G1期细胞比例(73.5%)高于非特异性序列转染组(53.9%)和未转染组(51.1%,均P<0.05).刺激48 h后,400 ng/ml rhAPRIL组和800 ng/ml rhAPRIL组HCT-116细胞G0/G1期细胞比例(分别为34.9%和22.7%)低于未刺激组(45.1%,均P<0.05).转染48 h后,与非特异性序列转染组相比,APRIL-siRNA组SW480细胞cyclin D1和Bcl-2蛋白表达下降,p21蛋白表达增高.刺激48 h后,与未刺激组相比,400 ng/ml rhAPRILHCT-116细胞组cyclin D1和Bcl-2蛋白表达升高,p21蛋白表达下降.APRIL-siRNA转染SW480细胞后,APRIL-siRN

作者:汪桂华;卢美红;王敬春;王峰;丁伟峰;王跃国;鞠少卿;王惠民

来源:中华肿瘤杂志 2013 年 35卷 4期

知识库介绍

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作者:
汪桂华;卢美红;王敬春;王峰;丁伟峰;王跃国;鞠少卿;王惠民
来源:
中华肿瘤杂志 2013 年 35卷 4期
标签:
结直肠肿瘤 细胞增殖 肿瘤转移 增殖诱导配体 预后 Colorectal neoplasms Cell proliferation Neoplasm metastasis A proliferation-inducing ligand Prognosis
目的 探讨增殖诱导配体(APRIL)对结直肠癌细胞生长和转移的影响,以进一步明确APRIL在结直肠癌生物学行为中的作用.方法 APRIL基因的小干扰RNA质粒载体(APRIL-siRNA)转染人结直肠癌细胞SW480,重组人APRIL蛋白(rhAPRIL)刺激结直肠癌细胞HCT-116,采用CCK-8法检测细胞的增殖能力,流式细胞术检测细胞周期变化,Western blot检测细胞周期和凋亡调控蛋白cyclin D1、p21和Bcl-2的表达水平,Transwell小室侵袭和转移试验分析细胞侵袭及转移能力,逆转录聚合酶链反应检测基质金属蛋白酶2(MMP-2)和MMP-9 mRNA的表达变化.APRIL-siRNA转染的结直肠癌细胞SW480接种裸鼠,分析APRIL-siRNA对移植瘤生长和MMP表达的影响.结果 APRIL-siRNA组G0/G1期细胞比例(73.5%)高于非特异性序列转染组(53.9%)和未转染组(51.1%,均P<0.05).刺激48 h后,400 ng/ml rhAPRIL组和800 ng/ml rhAPRIL组HCT-116细胞G0/G1期细胞比例(分别为34.9%和22.7%)低于未刺激组(45.1%,均P<0.05).转染48 h后,与非特异性序列转染组相比,APRIL-siRNA组SW480细胞cyclin D1和Bcl-2蛋白表达下降,p21蛋白表达增高.刺激48 h后,与未刺激组相比,400 ng/ml rhAPRILHCT-116细胞组cyclin D1和Bcl-2蛋白表达升高,p21蛋白表达下降.APRIL-siRNA转染SW480细胞后,APRIL-siRN