目的：探讨三阴性乳腺癌（ TNBC）细胞对磷脂酰肌醇3激酶（ PI3K）抑制剂产生抗药性的分子机制。方法运用脂质体2000试剂盒将 siFZD7、siWANT5B 或 siGSK3转染 TNBC 细胞HCC70，Western blot法测定WNT／β?连环蛋白（ WNT／β?catenin）和磷脂酰肌醇3激酶／苏氨酸激酶／雷帕霉素靶蛋白（ PI3K／AKT／mTOR）信号通路关键蛋白的表达。将PI3K／AKT／mTOR通路抑制剂作用TNBC细胞HCC70、雌激素受体（ER）阳性乳腺癌细胞MCF?7和人表皮生长因子受体2（HER2）阳性乳腺癌细胞SK?BR3，采用四甲基偶氮唑蓝（ MTT）法检测细胞增殖抑制率，并计算半数抑制浓度（ IC50）；Western blot和荧光素酶报告基因实验检测WNT／β?catenin和PI3K／AKT／mTOR信号通路的活性变化对乳腺癌细胞增殖的影响；免疫荧光实验检测β?catenin蛋白核转位。将BKM120处理的乳腺癌细胞皮下注入裸鼠体内，观察其致瘤能力，采用免疫组化法检测肿瘤组织中磷酸化肺耐药相关蛋白6（p?LRP6）、磷酸化eIF4E结合蛋白1（p?4EBP1）和β?catenin蛋白的表达。结果 siRNA转染的HCC70细胞中，卷曲蛋白7（FZD7）、细胞外因子5B （WANT5B）、糖原合成酶激酶3（GSK3）表达显著降低，WNT／β?catenin活性升高，PI3K／AKT／mTOR活性降低。 PI3K／AKT／mTOR通路抑制

作者：张文龙；马文江；陈圣；吴西钊；张贺然；张建华

来源：中华肿瘤杂志 2016 年 38卷 8期