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目的:探讨miR-146a对食管鳞癌细胞增殖、侵袭、迁移、凋亡及细胞周期等生物学行为的影响及其机制。方法:应用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)技术检测miR-146a在食管鳞癌细胞株Eca109、KYSE140和KYSE150中的表达。将miR-146a模拟物转染Eca109细胞,上调miR-146a的表达,采用细胞增殖实验检测细胞的增殖能力,Transwell实验检测细胞的侵袭能力,划痕实验检测细胞的迁移能力,流式细胞术检测细胞的凋亡和细胞周期。运用相关生物信息学技术预测miR-146a的靶基因,采用双荧光素酶报告基因实验检测miR-146a与靶基因白介素1受体相关激酶1(IRAK1)3′端非翻译区(3′UTR)的结合情况,RT-qPCR技术和Western blot法分别检测靶基因mRNA和蛋白的表达。结果:食管鳞癌Eca109、KYSE140和KYSE150细胞中miR-146a的相对表达量分别为0.36±0.05、0.16±0.06和0.09±0.02,均低于食管正常上皮细胞HEEC(1.00±0.05,均 P<0.01)。miR-146a模拟物转染Eca109细胞后,细胞的吸光度值、穿膜细胞数[(52±18)个]、划痕减少距离[48 h为(25.29±0.77)μm,72 h为(30.66±0.91)μm]均明显低于阴性对照组和空白对照组(均 P<0.01),早期凋亡率[(6.13±0.91)

作者:谢文英;杨升

来源:中华肿瘤杂志 2020 年 42卷 11期

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作者:
谢文英;杨升
来源:
中华肿瘤杂志 2020 年 42卷 11期
标签:
食管鳞癌 miR-146a Eca109细胞 生物学行为 白介素1受体相关激酶1 Esophageal squamous cell carcinoma MiR-146a Eca109 cell Biological behavior Interleukin-1 receptor-associated kinase 1
目的:探讨miR-146a对食管鳞癌细胞增殖、侵袭、迁移、凋亡及细胞周期等生物学行为的影响及其机制。方法:应用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)技术检测miR-146a在食管鳞癌细胞株Eca109、KYSE140和KYSE150中的表达。将miR-146a模拟物转染Eca109细胞,上调miR-146a的表达,采用细胞增殖实验检测细胞的增殖能力,Transwell实验检测细胞的侵袭能力,划痕实验检测细胞的迁移能力,流式细胞术检测细胞的凋亡和细胞周期。运用相关生物信息学技术预测miR-146a的靶基因,采用双荧光素酶报告基因实验检测miR-146a与靶基因白介素1受体相关激酶1(IRAK1)3′端非翻译区(3′UTR)的结合情况,RT-qPCR技术和Western blot法分别检测靶基因mRNA和蛋白的表达。结果:食管鳞癌Eca109、KYSE140和KYSE150细胞中miR-146a的相对表达量分别为0.36±0.05、0.16±0.06和0.09±0.02,均低于食管正常上皮细胞HEEC(1.00±0.05,均 P<0.01)。miR-146a模拟物转染Eca109细胞后,细胞的吸光度值、穿膜细胞数[(52±18)个]、划痕减少距离[48 h为(25.29±0.77)μm,72 h为(30.66±0.91)μm]均明显低于阴性对照组和空白对照组(均 P<0.01),早期凋亡率[(6.13±0.91)