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目的 探讨Bmi1对小鼠颅缝间充质干细胞增殖能力的影响.方法 首先分离并培养出生后2~5d的同窝C57BL/6 J乳鼠(6只)原代后额缝及矢状缝衍生细胞,通过流式细胞术及多系分化能力鉴定2种颅缝来源细胞的间充质干细胞特性,进一步通过实时定量聚合酶链反应检测2种颅缝间充质干细胞中干细胞特性相关基因Bmi1、Twist1、Axin2及Gli1 mRNA表达水平,并在矢状缝间充质细胞中转染Bmi1小干扰RNA下调Bmi1的表达,分析其对颅缝间充质干细胞增殖能力的影响及下游蛋白的变化.2组间均数比较采用t检验,P<0.05为差异有统计学意义.结果 在体外成功培养出小鼠颅缝衍生细胞,通过流式细胞术发现,该细胞系大量表达间充质干细胞标志CD44、CD90、CD73,不表达CD34,并具有成骨、成软骨及成脂分化能力.实时定量聚合酶链式反应结果表明,与矢状缝间充质干细胞相比,Bmi1(0.006 30±0.000 58比0.002 60±0.000 34、t=5.430、P=0.0056)、Twist1(0.00031±0.00004比0.00015±0.00002、t=3.343、P=0.0288)、Axin2(0.000 33±0.000 03比0.000 17±0.000 05、t=3.067、P=0.0374)及Gli1 mRNA (0.00110±0.000 13比0.000 60±0.000 33、t=3.956、P=0.016 7),在后额缝间充质干细胞中表达呈不同程度地下降,其中Bmi1下降程度最高.在矢状缝间充质干细胞中

作者:孔亮亮;王媛;施丽君;陈建兵;崔杰;沈卫民

来源:中华整形外科杂志 2019 年 35卷 2期

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作者:
孔亮亮;王媛;施丽君;陈建兵;崔杰;沈卫民
来源:
中华整形外科杂志 2019 年 35卷 2期
标签:
Bmi1 颅缝 间充质干细胞 小鼠 Bmi1 Cranial suture Mesenchymal stem cells Mouse
目的 探讨Bmi1对小鼠颅缝间充质干细胞增殖能力的影响.方法 首先分离并培养出生后2~5d的同窝C57BL/6 J乳鼠(6只)原代后额缝及矢状缝衍生细胞,通过流式细胞术及多系分化能力鉴定2种颅缝来源细胞的间充质干细胞特性,进一步通过实时定量聚合酶链反应检测2种颅缝间充质干细胞中干细胞特性相关基因Bmi1、Twist1、Axin2及Gli1 mRNA表达水平,并在矢状缝间充质细胞中转染Bmi1小干扰RNA下调Bmi1的表达,分析其对颅缝间充质干细胞增殖能力的影响及下游蛋白的变化.2组间均数比较采用t检验,P<0.05为差异有统计学意义.结果 在体外成功培养出小鼠颅缝衍生细胞,通过流式细胞术发现,该细胞系大量表达间充质干细胞标志CD44、CD90、CD73,不表达CD34,并具有成骨、成软骨及成脂分化能力.实时定量聚合酶链式反应结果表明,与矢状缝间充质干细胞相比,Bmi1(0.006 30±0.000 58比0.002 60±0.000 34、t=5.430、P=0.0056)、Twist1(0.00031±0.00004比0.00015±0.00002、t=3.343、P=0.0288)、Axin2(0.000 33±0.000 03比0.000 17±0.000 05、t=3.067、P=0.0374)及Gli1 mRNA (0.00110±0.000 13比0.000 60±0.000 33、t=3.956、P=0.016 7),在后额缝间充质干细胞中表达呈不同程度地下降,其中Bmi1下降程度最高.在矢状缝间充质干细胞中