目的 通过慢病毒转染敲低胃癌干细胞观察HDAC1表达对人类胃癌干细胞干性增殖、迁移及侵袭的影响以及对胃癌干细胞干性相关基因表达的影响,进一步探讨HDAC1低表达对人类胃癌干细胞增殖分化的影响及机制.方法 2017年7—10月于华北石油管理局总医院细胞实验室进行.通过慢病毒转染将细胞株分为实验组对照组.以Nanog为胃癌细胞干性标志物,流式细胞术筛选出胃癌干细胞.通过慢病毒转染技术干扰胃癌干细胞中HDAC1表达,实时定量PCR(qRT-PCR)和Western Blot方法检测干扰效率.采用MTT比色法和划痕试验分别观察2组细胞增殖和迁移能力的差异;通过Transwell实验观察2组细胞侵袭能力的差异;采用qRT-PCR和Western Blot方法检测2组细胞干性相关基因表达.结果 (1)实验组胃癌干细胞的增殖能力在96 h、120 h,均显著低于对照组( t=5. 471、7. 251,P均<0. 001). (2)通过细胞划痕实验观察到实验组胃癌干细胞的24 h划痕愈合速度较对照组慢, HDAC1的低表达降低胃癌干细胞的迁移能力,2组比较差异具有统计学意义[(20. 23 ± 5. 46)个 vs. (39. 96 ± 3. 48)个,t=6. 813,P=0. 001]. (3)Transwell实验显示,实验组胃癌干细胞的侵袭能力显著低于对照组,HDAC1低表达降低胃癌干细胞的迁移能力,2 组穿膜细胞数差异具有统计学意义[(21. 51
作者:刘小娟;刘复娜;张艳芳;陈策
来源:疑难病杂志 2018 年 17卷 7期