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目的:建立能同时检测星状病毒、轮状病毒和甲型肝炎病毒的单管多重荧光定量 RT -PCR 方法。方法根据 GenBank 上下载的上述3种病毒基因组保守序列设计引物和探针,建立并分析多重荧光 RT -PCR 的重复性、特异性和敏感性;以所建立方法对128例病毒性腹泻患者粪便标本进行检测,同时以基因测序进行验证。结果所建立的多重荧光 RT -PCR 检测方法对轮状病毒、星状病毒和甲型肝炎病毒具有很好的特异性和重复性,轮状病毒灵敏度达到101拷贝,星状病毒和甲型肝炎病毒灵敏度达到102拷贝。128份粪便标本中,轮状病毒和星状病毒的检出率分别为17.97%和3.13%,甲型肝炎病毒未检出。与基因测序比对结果相符。结论用于轮状病毒、星状病毒和甲肝病毒的单管多重荧光定量 RT -PCR 方法快速、特异且灵敏,可用于临床病原诊断和流行病学调查。

作者:徐德顺;朱晓娟;陈莉萍;吴晓芳;纪蕾

来源:浙江预防医学 2015 年 4期

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作者:
徐德顺;朱晓娟;陈莉萍;吴晓芳;纪蕾
来源:
浙江预防医学 2015 年 4期
标签:
星状病毒 轮状病毒 甲型肝炎病毒 逆转录聚合酶链反应 Astrovirus Rotavirus Hepatitis A virus Reverse transcriptase polymerase chain reaction
目的:建立能同时检测星状病毒、轮状病毒和甲型肝炎病毒的单管多重荧光定量 RT -PCR 方法。方法根据 GenBank 上下载的上述3种病毒基因组保守序列设计引物和探针,建立并分析多重荧光 RT -PCR 的重复性、特异性和敏感性;以所建立方法对128例病毒性腹泻患者粪便标本进行检测,同时以基因测序进行验证。结果所建立的多重荧光 RT -PCR 检测方法对轮状病毒、星状病毒和甲型肝炎病毒具有很好的特异性和重复性,轮状病毒灵敏度达到101拷贝,星状病毒和甲型肝炎病毒灵敏度达到102拷贝。128份粪便标本中,轮状病毒和星状病毒的检出率分别为17.97%和3.13%,甲型肝炎病毒未检出。与基因测序比对结果相符。结论用于轮状病毒、星状病毒和甲肝病毒的单管多重荧光定量 RT -PCR 方法快速、特异且灵敏,可用于临床病原诊断和流行病学调查。