目的构建NF2突变体真核表达载体,并观察其在人胚肾细胞HEK293中的表达.方法采用分子生物学方法构建NF2突变体,将突变体克隆入真核表达载体pEGFP-N1中,进行筛选和鉴定,然后在脂质体介导下,将重组载体转染至真核细胞HEK293中,应用Western blot法检测蛋白的表达.结果通过使用重叠延伸PCR法定位突变,从野生型NF2基因cDNA模板中扩增得到预期大小的NF2突变体条带,DNA测序证实NF2突变体序列的正确性.重组载体转染HEK293后能产生merlin蛋白.结论 本研究成功构建重组载体pEGFP-N1-NF2突变体,其转染HEK293后,能有效表达于HEK293中.
作者：林亦海；卞留贯；薛跃华；孙青芳；贺子建；贺华；赵卫国；沈建康
来源：浙江医学 2010 年 32卷 8期
