目的 研究大黄素是否可增强5AzA-cdR对胰腺癌Panc1细胞抑癌基因p16、RASSF1A的去甲基化作用.方法 采用细胞增殖实验检测不同浓度大黄素对Panc1细胞的生长抑制情况,焦磷酸盐测序PCR(BSP)分别检测大黄素、5AzA-cdR及大黄素联合5AzA-cdR对Panc1细胞抑癌基因p16 、RASSF1A甲基化状态的影响,并用荧光定量PCR(FQ-PCR)和Western blot分别检测p16 、RASSF1A及甲基转移酶DNMT1、DNMT3a在mRNA和蛋白水平的表达情况.结果 大黄素以时间和浓度梯度依赖性抑制Panc1细胞生长.BSP结果显示大黄素具有微弱的去甲基化作用,5AzA-cdR具有一定程度的去甲基化作用,当两者联用时,去甲基化作用更加显著;FQ-PCR和Western blot结果显示大黄素与5AzA-cdR联用时,p16、RASSF1A的表达水平均较空白对照明显增高(均P<0.05),DNMT1、DNMT3a的表达水平均较空白对照明显降低(均P<0.05).结论 大黄素与5AzA-cdR联用可通过降低DNMT1和DNMT3a的表达水平来增强5AzA-cdR对胰腺癌抑癌基因p16、RASSF1A的去甲基化作用.
作者:潘烽平;徐鹿平;陆松春;陈自强;唐坚;褚永权;陈亮
来源:浙江医学 2016 年 38卷 5期