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目的 探讨LncRNA NNT-AS1对胃癌细胞增殖、凋亡的作用机制.方法 采用实时荧光定量PCR法检测胃癌细胞系KATO-ⅢⅡ、NUGC-3、AGS、N87及正常胃成纤维细胞系NSFC中LncRNA NNT-AS1的表达水平;将KATO-Ⅲ细胞系分成对照组、sh-vector组及sh-NNT-AS1组,分别不感染慢病毒、感染阴性shRNA慢病毒及感染lenti-sh-NNT-AS1慢病毒.采用MTT实验检测细胞增殖情况,流式细胞术检测细胞凋亡情况,Western blot检测细胞凋亡蛋白Caspase 3、8、9的表达水平,并进行组间比较.结果 胃癌细胞系KATO-Ⅲ、NUGC-3、AGS、N87 LncRNA NNT-AS1的表达水平均明显高于正常胃成纤维细胞系NSFC(均P<0.01).细胞培养12、24、48、72 h后,相比sh-vector组、对照组,sh-NNT-AS1组吸光度值(OD490值)明显降低(均P<0.05).细胞培养7d后,sh-NNT-AS1组克隆形成数明显低于sh-vector组、对照组(均P<0.05).sh-NNT-AS1组细胞凋亡率明显高于sh-vector组、对照组(均P<0.01).sh-NNT-AS1组细胞凋亡蛋白Caspase3、9表达水平均高于sh-vector组(均P<0.05),而Caspase 8表达水平比较差异无统计学意义(P>0.05).结论 LncRNA NNT-AS1促进胃癌细胞增殖,抑制凋亡,机制可能与上调凋亡蛋白Caspase3、9表达有关.

作者:帅勇锋;王小军;张一中

来源:浙江医学 2018 年 40卷 5期

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作者:
帅勇锋;王小军;张一中
来源:
浙江医学 2018 年 40卷 5期
标签:
LncRNA NNT-AS1 胃癌 增殖 凋亡 LncRNA NNT-AS1 Gastric carcinoma Proliferation Apoptosis
目的 探讨LncRNA NNT-AS1对胃癌细胞增殖、凋亡的作用机制.方法 采用实时荧光定量PCR法检测胃癌细胞系KATO-ⅢⅡ、NUGC-3、AGS、N87及正常胃成纤维细胞系NSFC中LncRNA NNT-AS1的表达水平;将KATO-Ⅲ细胞系分成对照组、sh-vector组及sh-NNT-AS1组,分别不感染慢病毒、感染阴性shRNA慢病毒及感染lenti-sh-NNT-AS1慢病毒.采用MTT实验检测细胞增殖情况,流式细胞术检测细胞凋亡情况,Western blot检测细胞凋亡蛋白Caspase 3、8、9的表达水平,并进行组间比较.结果 胃癌细胞系KATO-Ⅲ、NUGC-3、AGS、N87 LncRNA NNT-AS1的表达水平均明显高于正常胃成纤维细胞系NSFC(均P<0.01).细胞培养12、24、48、72 h后,相比sh-vector组、对照组,sh-NNT-AS1组吸光度值(OD490值)明显降低(均P<0.05).细胞培养7d后,sh-NNT-AS1组克隆形成数明显低于sh-vector组、对照组(均P<0.05).sh-NNT-AS1组细胞凋亡率明显高于sh-vector组、对照组(均P<0.01).sh-NNT-AS1组细胞凋亡蛋白Caspase3、9表达水平均高于sh-vector组(均P<0.05),而Caspase 8表达水平比较差异无统计学意义(P>0.05).结论 LncRNA NNT-AS1促进胃癌细胞增殖,抑制凋亡,机制可能与上调凋亡蛋白Caspase3、9表达有关.