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目的 通过构建转人4-1BBL-B7-H3基因肿瘤细胞株,探讨4-1BBL-B7-H3体外诱导抗肿瘤免疫的能力.方法 通过脂质体法将真核表达载体pEGFP-4-1BBL-B7H3转染人口腔鳞癌Tca8113细胞,经G418筛选及有限稀释后获得稳定高表达克隆,用流式细胞仪分析表型,RT-PCR检测转染细胞中4-1BBL-B7-H3 mRNA的表达.用淋巴细胞分离液分离纯化人外周血T淋巴细胞,分别与转染4-1BBL、B7-H3、4-1BBL-B7-H3的Tca8113细胞混合培养.用CCK-8法检测细胞毒性T细胞(CTL)杀伤活性;ELISA法检测培养上清液中IFN-y水平.结果 转基因Tca8113细胞能够稳定高表达4-1BBL-B7-H3.与Tca8113细胞相比较,转染4-1BBL-B7-H3的Tca8113细胞能够显著增强T细胞增殖,促进IFN-y分泌,并有效地诱导CTL产生对Tca8113细胞的特异性杀伤作用.结论 转染人4-1BBL-B7-H3基因既能增强口腔鳞癌Tca8113细胞的免疫原性,亦能诱导T细胞产生有效的抗肿瘤免疫应答.

作者:孙顺涛;杨宏宇;罗娟;余术宜;杨辉俊

来源:浙江医学 2018 年 40卷 24期

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作者:
孙顺涛;杨宏宇;罗娟;余术宜;杨辉俊
来源:
浙江医学 2018 年 40卷 24期
标签:
4-1BBL-B7-H3 肿瘤疫苗 免疫基因治疗 抗肿瘤免疫
目的 通过构建转人4-1BBL-B7-H3基因肿瘤细胞株,探讨4-1BBL-B7-H3体外诱导抗肿瘤免疫的能力.方法 通过脂质体法将真核表达载体pEGFP-4-1BBL-B7H3转染人口腔鳞癌Tca8113细胞,经G418筛选及有限稀释后获得稳定高表达克隆,用流式细胞仪分析表型,RT-PCR检测转染细胞中4-1BBL-B7-H3 mRNA的表达.用淋巴细胞分离液分离纯化人外周血T淋巴细胞,分别与转染4-1BBL、B7-H3、4-1BBL-B7-H3的Tca8113细胞混合培养.用CCK-8法检测细胞毒性T细胞(CTL)杀伤活性;ELISA法检测培养上清液中IFN-y水平.结果 转基因Tca8113细胞能够稳定高表达4-1BBL-B7-H3.与Tca8113细胞相比较,转染4-1BBL-B7-H3的Tca8113细胞能够显著增强T细胞增殖,促进IFN-y分泌,并有效地诱导CTL产生对Tca8113细胞的特异性杀伤作用.结论 转染人4-1BBL-B7-H3基因既能增强口腔鳞癌Tca8113细胞的免疫原性,亦能诱导T细胞产生有效的抗肿瘤免疫应答.