[目的]体外建立紫杉醇（Taxol）耐药的人肝癌细胞株Hep3B/TAX，并以此为模型对凋亡抵抗现象与紫杉醇耐药的相关性进行研究。[方法]采用浓度梯度间歇刺激法建立Hep3B/TAX耐药细胞株，MTT法检测Hep3B/TAX对紫杉醇的耐药性，流式细胞术检测Hep3B/TAX的细胞凋亡水平，荧光定量PCR检测Hep3B和Hep3B/TAX细胞株中Bcl－2、Bax、caspase3、caspase8和caspase9基因的表达水平，蛋白质免疫印迹（Western－blot）检测Hep3B、Hep3B/TAX细胞株中Bcl－2、Bax、caspase3、caspase8和caspase9的蛋白表达。[结果] Hep3B细胞对紫杉醇的IC50为0．2mΜ，而耐药细胞株Hep3B/TAX对紫杉醇的IC50升为4．33μM。耐药指数（RI）为21．65。流式细胞术结果显示，0．1μM、0．2μM紫杉醇处理24h后，亲本细胞Hep3B的凋亡率显著高于耐药细胞株Hep3B/TAX。RT－PCR结果显示，与Hep3B细胞株相比，Hep3B/TAX细胞株中Bcl－2 mRNA的表达量显著升高（P<0．01），而caspase3、caspase8、caspase9和Bax mRNA的表达量显著降低（P<0．01）。Western－blot实验结果显示，与Hep3B细胞株相比，Hep3B/TAX耐药细胞株的抗凋亡蛋白Bcl－2的表达量显著升高，相关促凋亡蛋白caspase3、caspase8、caspase9和Bax的表达量降低。[结论]成功建立紫杉醇耐药的人肝癌

作者：周明杰；韩子午；范春雷；钱颖；田男

来源：浙江中医药大学学报 2015 年 2期