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目的:探讨磷脂酶Cε1(phospholipase C epsilon-1,PLCE1)基因过表达对结肠癌细胞迁移、细胞周期及凋亡等生物学特性的影响.方法:采用脂质体转染的方法建立PLCE1过表达的SW620细胞株,实验分为3组:亲本细胞组(未转染基因),对照组[转染含绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)的空质粒],实验组(转染质粒pcDNA-DEST53-PLCE1).分别采用实时荧光定量-PCR(real-time fluorogenic quantitative-PCR,RFQ-PCR)和蛋白质印迹法检测PLCE1 mRNA和蛋白在SW620细胞中的表达;Transwell小室法检测PLCE1过表达对SW620细胞迁移能力的影响,FCM法检测对细胞周期及凋亡率的影响,DNA Ladder法检测对细胞凋亡的影响.结果:PLCE1过表达可抑制结肠癌SW620细胞的迁移能力,实验组迁移细胞数为(8.80±1.72)个,而亲本组和对照组分别为(32.6±2.42)和(32.2±3.25)个,3组间差异有统计学意义(P<0.01).PLCE1过表达可导致结肠癌细胞周期G1期延长,并出现凋亡.结论:PLCE1过表达可抑制结肠癌细胞的迁移能力,并引起细胞凋亡.PLCE1基因过表达使SW620结肠癌细胞恶性程度降低,该基因可能是新的结肠癌相关抑癌基因.

作者:王晓亮;周崇治;裘国强;樊军卫;邢同海;李涛;孙星;唐华美;彭志海

来源:肿瘤 2011 年 31卷 11期

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王晓亮;周崇治;裘国强;樊军卫;邢同海;李涛;孙星;唐华美;彭志海
来源:
肿瘤 2011 年 31卷 11期
标签:
结肠肿瘤 磷脂酶C 转染 细胞凋亡 SW620细胞
目的:探讨磷脂酶Cε1(phospholipase C epsilon-1,PLCE1)基因过表达对结肠癌细胞迁移、细胞周期及凋亡等生物学特性的影响.方法:采用脂质体转染的方法建立PLCE1过表达的SW620细胞株,实验分为3组:亲本细胞组(未转染基因),对照组[转染含绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)的空质粒],实验组(转染质粒pcDNA-DEST53-PLCE1).分别采用实时荧光定量-PCR(real-time fluorogenic quantitative-PCR,RFQ-PCR)和蛋白质印迹法检测PLCE1 mRNA和蛋白在SW620细胞中的表达;Transwell小室法检测PLCE1过表达对SW620细胞迁移能力的影响,FCM法检测对细胞周期及凋亡率的影响,DNA Ladder法检测对细胞凋亡的影响.结果:PLCE1过表达可抑制结肠癌SW620细胞的迁移能力,实验组迁移细胞数为(8.80±1.72)个,而亲本组和对照组分别为(32.6±2.42)和(32.2±3.25)个,3组间差异有统计学意义(P<0.01).PLCE1过表达可导致结肠癌细胞周期G1期延长,并出现凋亡.结论:PLCE1过表达可抑制结肠癌细胞的迁移能力,并引起细胞凋亡.PLCE1基因过表达使SW620结肠癌细胞恶性程度降低,该基因可能是新的结肠癌相关抑癌基因.