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目的 探讨以RNA干扰(RNA interference,RNAi)技术靶向stathmin和mdrl基因逆转卵巢癌细胞紫杉醉耐药的可行性.方法 分别构建靶向stathmin和mdrl基因的质粒:pGU6-GFP-neo-STMNI和pGU6-GFP-neo-MDRI;将质粒转染到卵巢癌紫杉醉耐药细胞株SKOV3/TAX,Real-time RTPCR检测stathminm和mdrl的mRNA变化;Western blot检测其蛋白表达变化;荧光显微镜检测细胞凋亡情况;CCK-8法分析细胞对紫杉醉的敏感度.结果 Real-time RT-PCR及Western blot显示pGU6-GFP-neo-MDRl质粒对mdrl基因,pGU6-GFP-STMN1-294shRNA质粒对stathmin基因在mRNA水平和蛋白水平均有明显抑制(P<0.05),荧光显微镜下共转染组细胞凋亡增多,CCK-8示共转染组逆转紫杉醉耐药效果最明显.结论 体外RNAi可有效沉默卵巢癌紫杉醉耐药株SKOV3/TAX细胞内:tathmin基因和mdrl基因,逆转其紫杉醇耐药.

作者:肖玉洁;王红梅;韩正祥;高向阳;裴冬生;曾令宇;杜秀平

来源:肿瘤防治研究 2011 年 38卷 3期

知识库介绍

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作者:
肖玉洁;王红梅;韩正祥;高向阳;裴冬生;曾令宇;杜秀平
来源:
肿瘤防治研究 2011 年 38卷 3期
标签:
RNAi stathmin mdr1 紫杉醇耐药
目的 探讨以RNA干扰(RNA interference,RNAi)技术靶向stathmin和mdrl基因逆转卵巢癌细胞紫杉醉耐药的可行性.方法 分别构建靶向stathmin和mdrl基因的质粒:pGU6-GFP-neo-STMNI和pGU6-GFP-neo-MDRI;将质粒转染到卵巢癌紫杉醉耐药细胞株SKOV3/TAX,Real-time RTPCR检测stathminm和mdrl的mRNA变化;Western blot检测其蛋白表达变化;荧光显微镜检测细胞凋亡情况;CCK-8法分析细胞对紫杉醉的敏感度.结果 Real-time RT-PCR及Western blot显示pGU6-GFP-neo-MDRl质粒对mdrl基因,pGU6-GFP-STMN1-294shRNA质粒对stathmin基因在mRNA水平和蛋白水平均有明显抑制(P<0.05),荧光显微镜下共转染组细胞凋亡增多,CCK-8示共转染组逆转紫杉醉耐药效果最明显.结论 体外RNAi可有效沉默卵巢癌紫杉醉耐药株SKOV3/TAX细胞内:tathmin基因和mdrl基因,逆转其紫杉醇耐药.