目的：原核表达并纯化高尔基体糖蛋白-73（GolgiProtein73，GP73）。方法以人肝癌细胞系HepG2总RNA为模板，经RT-PCR扩增GP73基因，克隆至原核表达载体pET-21a(+)-TRX中，转化大肠杆菌BL21(DE3)，IPTG诱导表达。His-tag磁珠纯化重组蛋白GP73，SDS-PAGE鉴定。结果克隆目的基因的序列正确，未发生碱基突变；重组表达质粒pET21a(+)-TRX-GP73经双酶切鉴定构建正确；表达的重组蛋白相对分子量为80 kD，与预期相符。结论本实验成功在大肠杆菌BL21（DE3）中表达并纯化了GP73重组蛋白，为后续研究奠定了基础。
作者：谢平丽；赵艳洁；李跃辉；王宇环；罗晓玲；李官成
来源：肿瘤药学 2014 年 3期
