目的 筛选最佳的体外原代心肌(PC)细胞代谢组学样品预处理方法,对超高效液相色谱-飞行时间质谱联用技术(UPLC/Q-TOF-MS)的色谱-质谱条件优化,为建立体外心肌毒性代谢组学研究方法奠定基础.方法 利用UPLC/Q-TOF-MS技术,分别考察0.05％胰酶消化后冰甲醇提取和刮刀刮取后6种不同溶剂提取的心肌细胞样品预处理方法,考察5种流动相梯度洗脱方案和正、负离子检测模式下的基峰离子流图,利用质量控制样本(QC)进行仪器精密度、方法精密度和样本稳定性试验等方法学考察.结果 最佳的心肌细胞样品预处理方法为:0.05％胰蛋白酶-0.02％EDTA消化后-80℃甲醇直接提取.最佳的流动相洗脱程序为:0 min,2.0％ A;2min,25.0％ A:6min,40.0％ A;12min,90.0％ A;保持2min:16min,2.0％A;保持2 min.最佳的质谱检测模式为:正离子模式.本方法的仪器精密度、方法精密度和样本稳定性试验以相对峰面积比值的RSD计分别为4.9％～14.9％、8.6％～17.8％和5.2％～16.3％,以保留时间的RSD计均＜1.0％,符合检测要求.结论 确定了最佳的心肌细胞样品预处理方法及UPLC/Q-TOF-MS分析条件,为建立和完善体外心肌毒性代谢组学研究提供参考依据.
作者：李黎；张兴；申秀萍；钱鑫；张宗鹏；刘昌孝
来源：药物评价研究 2016 年 39卷 4期
