目的:研究miR-29b过表达对NIH/3T3细胞直接靶向作用及其细胞功能变化的影响.方法:将活化的NIH/3T3细胞,分为空白对照(Control)组、miR-29b mimics组、miR-Negative Control(miR-NC)组、TGF-β1组、TGF-β1+ miR-29b mimics组、TGF-β1+miR-NC组.采用免疫荧光技术、RT-PCR及Western Blot检测miR-29b、COL1α1、COL3 α1、TIMP-1、MMP-9、HSP47、α-SMA表达,流式细胞术检测细胞凋亡,CCK-8法检测细胞增殖.结果:miR-29bmimics组与miR-NC组和Control组比较,miR-29b表达上调,COL1 α1及COL3α1 mRNA及蛋白表达下调(P＜0.05).TGF-β1+ miR-29b mimics组与TGF-β1组、TGF-β1+ miR-NC组比较,miR-29b表达明显上调(P＜0.01),COL1 α1、COL3 α1、TIMP-1、HSP47、α-SMA mRNA及蛋白均明显下降,MMP-9 mRNA及蛋白均明显升高(P＜0.05).TGF-β1+ miR-29b mimics组与TGF-β1组、TGF-β1+ miR-NC组比较早期凋亡明显增多,而细胞活力明显下降,与Control组比较差异有统计学意义(P＜0.05).结论:COL1α1及COL3α1是miR-29b的直接靶向调控分子,体外上调miR-29b表达可抑制TGF-β1致纤维化相关因子表达及细胞活力,并可促进细胞凋亡,为进一步研究体内肝纤维化奠定了基础.

作者：邓菊红；范翔雪；陶然；宋启琴；孔红言；焦云桃；黄加权

来源：中西医结合肝病杂志 2018 年 28卷 2期