目的 利用细胞能量代谢检测系统(seahorse XF analyzer)探讨H9C2大鼠心肌细胞能量代谢的影响因素.方法 H9c2大鼠心肌细胞贴壁培养后以不同细胞密度接种于Seahorse XF24孔板,利用糖酵解压力试剂盒检测糖酵解压力曲线;以105/mL密度接种细胞,以不同浓度碳酰氰-4-三氟甲氧基苯胺(FCCP)刺激细胞,利用线粒体有氧氧化试剂盒检测线粒体功能.结果 各密度下细胞反应良好,以2×104细胞数对寡霉素刺激后的速率数值较好,为50~400范围,是较合适的细胞密度;2μmol/L FCCP能刺激最大反应,为合适的FCCP浓度.结论 细胞密度和FCCP浓度是影响心肌细胞有氧氧化及无氧酵解功能测定的主要因素,H9c2心肌细胞以2×104/孔细胞密度接种,FCCP浓度2μmol/L刺激细胞将适合细胞线粒体功能的检测.
作者:李彬;崔琳;王新陆;王幼平;谢世阳;郝轩轩;高原;王小晓;朱明军
来源:中西医结合心脑血管病杂志 2019 年 17卷 1期