目的:研究骨碎补总黄酮(TFDF)对高浓度葡萄糖作用下成骨细胞(0B)分化活性及对细胞外信号调节蛋白激酶(ERK1/2)和p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)信号蛋白的影响,为TFDF能否用来防治糖尿病性骨质疏松提供细胞分子学依据.方法:二次酶消化法分离培养新生SD大鼠颅骨OB及活性观察；MTT法检测TFDF对OB的细胞毒性,确定实验药物在培养基中的添加剂量；pNPP、ELISA、茜素红染色法分别检测不同浓度葡萄糖对OB碱性磷酸酶活性(ALP)、Ⅰ型胶原(Col Ⅰ)、骨钙素(BGP)以及矿化能力的影响,并观察TFDF对高糖作用下OB分化活性的干预作用；Western-blot检测TFDF对高糖作用下OB ERK1/2和p38蛋白磷酸化的情况.结果:原代分离培养新生SD大鼠OB,具有典型的OB分化特性；根据TFDF对OB的毒性试验,选择TFDF的浓度25、50、100 mg/L为实验梯度浓度；葡萄糖(25、50mmol/L)可以降低OB表达ALP、Col Ⅰ、BGP,降低其矿化能力；TFDF能剂量依赖性的提高高糖(25 mmol/L)作用下OB表达ALP、Col Ⅰ、BGP和矿化能力；TFD)F(50 mg/L)能提高高糖(25 mmol/L)作用下p38和ERK1/2的蛋白磷酸化.结论:高糖可以降低OB分化和矿化能力,TFDF可提高高糖作用下OB的分化和矿化能力,其作用机理可能和提高p38和ERK1/2信号蛋白的磷酸化有关.
作者：朱晓峰；王廷春；张荣华；孙升云；王攀攀；杨丽；韩莉；金玲
来源：中药材 2012 年 35卷 3期
