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目的:分析白芥子提取物对HeLa细胞增殖、迁移与侵袭的作用及可能机制.方法:用终浓度分别为20、40、80μg/mL的白芥子提取物培养HeLa细胞,作为白芥子各浓度组,以未经任何处理的HeLa细胞作对照组.将pcDNA3.1、pcDNA3.1-CASC2、si-NC、si-CASC2分别转染至正常培养的HeLa细胞中,记为pcDNA3.1组、pcDNA3.1-CASC2组、si-NC组、si-CASC2组;再将转染si-NC、si-CASC2的细胞用终浓度为80μg/mL的白芥子提取物培养,记为白芥子+si-NC组、白芥子+si-CASC2组.蛋白质印迹(Western blot)检测细胞周期素D1(CyclinD1)、细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂1A(P21)、上皮钙黏蛋白(E-cadherin)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)表达;四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)试剂盒检测细胞活力;Transwell检测细胞迁移和侵袭;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测癌症易感候选基因2(CASC2)和miR-18b-5p表达;荧光素酶报告实验检测CASC2和miR-18b-5p的靶向关系.结果:与对照组比较,不同浓度白芥子组HeLa细胞Cyclin D1、MMP-2蛋白表达显著降低,P21、E-cadherin蛋白表达显著升高,细胞活力及迁移、侵袭细胞数显著降低(P<0.05),且白芥子提取物的作用呈浓度依赖性.白芥子处理的HeLa细胞中CASC2高表达,miR-18b-5p低表达.与pcDNA3.1组比较,pcDNA3.1-CASC2组HeLa细胞Cyclin D

作者:金璇;周鹤峰

来源:中药材 2020 年 43卷 12期

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作者:
金璇;周鹤峰
来源:
中药材 2020 年 43卷 12期
标签:
白芥子;CASC2;宫颈癌;增殖;迁移;侵袭
目的:分析白芥子提取物对HeLa细胞增殖、迁移与侵袭的作用及可能机制.方法:用终浓度分别为20、40、80μg/mL的白芥子提取物培养HeLa细胞,作为白芥子各浓度组,以未经任何处理的HeLa细胞作对照组.将pcDNA3.1、pcDNA3.1-CASC2、si-NC、si-CASC2分别转染至正常培养的HeLa细胞中,记为pcDNA3.1组、pcDNA3.1-CASC2组、si-NC组、si-CASC2组;再将转染si-NC、si-CASC2的细胞用终浓度为80μg/mL的白芥子提取物培养,记为白芥子+si-NC组、白芥子+si-CASC2组.蛋白质印迹(Western blot)检测细胞周期素D1(CyclinD1)、细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂1A(P21)、上皮钙黏蛋白(E-cadherin)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)表达;四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)试剂盒检测细胞活力;Transwell检测细胞迁移和侵袭;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测癌症易感候选基因2(CASC2)和miR-18b-5p表达;荧光素酶报告实验检测CASC2和miR-18b-5p的靶向关系.结果:与对照组比较,不同浓度白芥子组HeLa细胞Cyclin D1、MMP-2蛋白表达显著降低,P21、E-cadherin蛋白表达显著升高,细胞活力及迁移、侵袭细胞数显著降低(P<0.05),且白芥子提取物的作用呈浓度依赖性.白芥子处理的HeLa细胞中CASC2高表达,miR-18b-5p低表达.与pcDNA3.1组比较,pcDNA3.1-CASC2组HeLa细胞Cyclin D