目的 获取土壤来源mctk基因编码s-腺苷甲硫氨酸合成酶基因,为通过基因工程生产s-腺苷甲硫氨酸创造条件.方法 设计metk基因特异简并引物,以土壤总DNA为模板,利用PCR技术扩增得到一条metk基因编码区,通过TA克隆、测序和同源比对及进化分析表明该基因为放线菌来源metk基因.结果 该基因全长编码区为1209bp.推测该基因编码全长为402个氨基酸残基,等电点(Pl)为4.68、分子量为43452道尔顿,含有S-腺苷甲硫复酸合成酶全酶必备的3个完整功能区的酸性蛋白质.进化分析表明该蛋白与天蓝色链霉菌A3(2)来源的s-腺苷甲硫氨酸合成酶基因相似性高达98%.结论 成功从土壤总DNA中克隆得到1条链霉菌同源的s-腺苷甲硫氨酸合成酶基因,为进一步利用该蛋白奠定了基础.
作者:吕玉红;凌锌;岳昌武
来源:遵义医学院学报 2011 年 34卷 5期