目的 构建针对Ⅱ型单纯疱疹病毒(HSV-2) ICP4基因的短发夹RNA(shRNA)重组表达载体,探究该载体表达的shRNA对HSV-2的抑制作用.方法 重组表达载体通过脂质体转染法转染HEK293细胞,并接种HSV-2,48 h后,实时荧光定量RT-PCR检测mRNA转录情况,Western blot检测ICP4蛋白的表达情况,终点滴定法测定病毒的滴度.结果 与对照组相比,干扰组对mRNA抑制率为71％,使蛋白表达减少71.81％,并且病毒滴度也明显降低(P＜0.05).结论 构建的pGPU6/Neo-shRNA ICP4重组质粒表达载体能在体外细胞水平上千扰HSV-2 ICP4的基因表达,抑制HSV-2在细胞中复制.
作者：袁俊杰；吕延成
来源：遵义医学院学报 2013 年 36卷 1期
