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目的 研究靶向HBV C基因的短发夹状RNA(shRNA)表达质粒对HepG2.2.15细胞中HBV的抑制作用.方法 设计构建两个靶向HBV C基因的shRNA表达质粒S1和S2,以及用于对照的非同源shRNA表达质粒S3.转染HepG2.2.15细胞后,通过RT-PCR和ELISA方法分别检测细胞中HBV C基因表达和细胞上清中HBV DNA、HBsAg和HBeAg表达.结果 在转染后24h时,HBV C基因mRNA表达量下降58%~83%,HBV DNA下降了2.44~3.36个1og值,HBsAg和HBeAg的表达水平分别降低了51%~79%和50%~77%.S1、S2联合运用可以提高对HBV的抑制作用,而S3无抑制效果.结论 靶向HBV C基因的shRNA表达质粒S1、S2及其联合运用,均能有效地抑制HepG2.2.15细胞中HBV的复制和表达.

作者:肖安;刘斌;焦晔;赵欣;刘明秋;严维耀;郑兆鑫

来源:西南国防医药 2012 年 22卷 12期

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作者:
肖安;刘斌;焦晔;赵欣;刘明秋;严维耀;郑兆鑫
来源:
西南国防医药 2012 年 22卷 12期
标签:
乙型肝炎病毒 RNA干扰 小干扰RNA 短发夹状RNA
目的 研究靶向HBV C基因的短发夹状RNA(shRNA)表达质粒对HepG2.2.15细胞中HBV的抑制作用.方法 设计构建两个靶向HBV C基因的shRNA表达质粒S1和S2,以及用于对照的非同源shRNA表达质粒S3.转染HepG2.2.15细胞后,通过RT-PCR和ELISA方法分别检测细胞中HBV C基因表达和细胞上清中HBV DNA、HBsAg和HBeAg表达.结果 在转染后24h时,HBV C基因mRNA表达量下降58%~83%,HBV DNA下降了2.44~3.36个1og值,HBsAg和HBeAg的表达水平分别降低了51%~79%和50%~77%.S1、S2联合运用可以提高对HBV的抑制作用,而S3无抑制效果.结论 靶向HBV C基因的shRNA表达质粒S1、S2及其联合运用,均能有效地抑制HepG2.2.15细胞中HBV的复制和表达.