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目的:观察透骨消痛胶囊对毒胡萝卜素(thapsigargin,TG)诱导的内质网应激(PEKR信号通路)介导的大鼠体外培养关节软骨细胞凋亡的影响.方法:采用4周龄SD大鼠膝关节软骨建立软骨细胞体外培养体系,将培养的第3代软骨细胞分为空白组、模型组及透骨消痛胶囊高、中、低剂量组.空白组不进行干预;模型组及透骨消痛胶囊高、中、低剂量组先以2 μmol·L-1 TG干预4h,然后模型组更换为正常培养基,透骨消痛胶囊高、中、低剂量组分别更换为浓度为100 μg·mL-1、50 μg·mL-1、25 μg·mL-1的含透骨消痛胶囊培养基干预24h.干预后以MTT法检测各组软骨细胞活性、以AnnexinV-FITC/PI双染法流式细胞术检测各组软骨细胞凋亡率、以Western Blot法检测各组软骨细胞中激活转录因子4(activating transcription factor4,ATF4)、结合免疫球蛋白(binding immunoglobulin protein,BIP)、天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶12(cysteine aspartate specific protease 12,Caspase12)和Caspase3的表达量.结果:①软骨细胞活性.5组软骨细胞吸光度比较,差异有统计学意义(0.428±0.009,0.226±0.028,0.345±0.025,0.301 ±0.035,0.269±0.033,F=39.462,P=0.000).模型组吸光度低于空白组(P=0.000);透骨消痛胶囊高、中、低剂量组吸光度均高于模型组(P=

作者:叶锦霞;付长龙;林洁;吴广文;郑春松;陈俊;叶蕻芝

来源:中医正骨 2017 年 29卷 6期

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作者:
叶锦霞;付长龙;林洁;吴广文;郑春松;陈俊;叶蕻芝
来源:
中医正骨 2017 年 29卷 6期
标签:
骨关节炎 透骨消痛胶囊 软骨细胞 软骨,关节 凋亡 内质网应激 毒胡萝卜素 大鼠 动物实验 osteoarthritis Tougu Xiaotong Jiaonang chondrocytes cartilage,articular apoptosis endoplasmic reticulum stress thapsigargin rats animal experimentation
目的:观察透骨消痛胶囊对毒胡萝卜素(thapsigargin,TG)诱导的内质网应激(PEKR信号通路)介导的大鼠体外培养关节软骨细胞凋亡的影响.方法:采用4周龄SD大鼠膝关节软骨建立软骨细胞体外培养体系,将培养的第3代软骨细胞分为空白组、模型组及透骨消痛胶囊高、中、低剂量组.空白组不进行干预;模型组及透骨消痛胶囊高、中、低剂量组先以2 μmol·L-1 TG干预4h,然后模型组更换为正常培养基,透骨消痛胶囊高、中、低剂量组分别更换为浓度为100 μg·mL-1、50 μg·mL-1、25 μg·mL-1的含透骨消痛胶囊培养基干预24h.干预后以MTT法检测各组软骨细胞活性、以AnnexinV-FITC/PI双染法流式细胞术检测各组软骨细胞凋亡率、以Western Blot法检测各组软骨细胞中激活转录因子4(activating transcription factor4,ATF4)、结合免疫球蛋白(binding immunoglobulin protein,BIP)、天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶12(cysteine aspartate specific protease 12,Caspase12)和Caspase3的表达量.结果:①软骨细胞活性.5组软骨细胞吸光度比较,差异有统计学意义(0.428±0.009,0.226±0.028,0.345±0.025,0.301 ±0.035,0.269±0.033,F=39.462,P=0.000).模型组吸光度低于空白组(P=0.000);透骨消痛胶囊高、中、低剂量组吸光度均高于模型组(P=