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目的 探讨血小板源性生长因子受体β(Platelet-derived growth factor receptor-β,PDGFR-β)/血小板源性生长因子(Platelet-derived growth factor,PDGF)信号通路在介导星形胶质细胞调控脑缺血后血脑屏障(Blood-brain barrier,BBB)功能恢复的分子机制.方法 利用siRNA尾静脉注射干扰星形胶质细胞胶质纤维酸性蛋白(Glial fibrillary acidic protein,GFAP)的基因表达;利用插线法制作脑缺血再灌注模型;免疫组织荧光染色分析GFAP基因干扰后星形胶质细胞的数量变化;利用绿色荧光示踪剂渗透实验分析GFAP基因干扰后BBB渗透性改变;利用苏木精-伊红染色法(Hematoxylin-eosin staining,HE)分析GFAP基因干扰后脑微出血改变.在PDGFR-β生后全身性基因敲除鼠(Estrogen-knockout,Esr-KO)诱导脑缺血模型,利用免疫印迹试验分析GDNF的表达水平;脑室泵入外源性GDNF之后分析脑缺血后脑水肿形成、神经功能恢复及内皮细胞紧密连接蛋白水平的变化.结果 于缺血第14 d GFAP siRNA预处理小鼠缺血边缘区的Vimentin+星形胶质细胞数量减少、荧光强度增高、微出血体积增大;于缺血第14 d Esr-KO鼠缺血边缘区GDNF蛋白表达明显减少;侧脑室注射GDNF可部分减轻Esr-KO鼠脑水肿严重程度、促进神经功能恢复,且可部分增加Esr-KO鼠缺血边缘区紧密

作者:申杰;徐桂华

来源:卒中与神经疾病 2022 年 29卷 2期

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作者:
申杰;徐桂华
来源:
卒中与神经疾病 2022 年 29卷 2期
标签:
血小板源性生长因子受体β;胶质细胞源性神经营养因子;星形胶质细胞;血脑屏障;周细胞
目的 探讨血小板源性生长因子受体β(Platelet-derived growth factor receptor-β,PDGFR-β)/血小板源性生长因子(Platelet-derived growth factor,PDGF)信号通路在介导星形胶质细胞调控脑缺血后血脑屏障(Blood-brain barrier,BBB)功能恢复的分子机制.方法 利用siRNA尾静脉注射干扰星形胶质细胞胶质纤维酸性蛋白(Glial fibrillary acidic protein,GFAP)的基因表达;利用插线法制作脑缺血再灌注模型;免疫组织荧光染色分析GFAP基因干扰后星形胶质细胞的数量变化;利用绿色荧光示踪剂渗透实验分析GFAP基因干扰后BBB渗透性改变;利用苏木精-伊红染色法(Hematoxylin-eosin staining,HE)分析GFAP基因干扰后脑微出血改变.在PDGFR-β生后全身性基因敲除鼠(Estrogen-knockout,Esr-KO)诱导脑缺血模型,利用免疫印迹试验分析GDNF的表达水平;脑室泵入外源性GDNF之后分析脑缺血后脑水肿形成、神经功能恢复及内皮细胞紧密连接蛋白水平的变化.结果 于缺血第14 d GFAP siRNA预处理小鼠缺血边缘区的Vimentin+星形胶质细胞数量减少、荧光强度增高、微出血体积增大;于缺血第14 d Esr-KO鼠缺血边缘区GDNF蛋白表达明显减少;侧脑室注射GDNF可部分减轻Esr-KO鼠脑水肿严重程度、促进神经功能恢复,且可部分增加Esr-KO鼠缺血边缘区紧密