目的 探讨旁分泌机制在脂肪间充质干细胞(adiopose-derived stem cells,ADSC)移植治疗心肌梗死中的作用.方法 原代分离和培养人ADSC,将经鉴定的第3~5代的ADSC用于实验.①用8~ 10周龄(20~24 g)的雄性C57 B/L小鼠,结扎左前降支建立心肌梗死(myocardial infaretion,MI)损伤模型,实验分假手术组,MI+ DMEM/F12组和MI+ ADSC-CM(conditioned medium,条件培养液)组(n=12).在MI处理的小鼠心肌梗死边缘区分别注射DMEM/F12和ADSC-CM,观察动物生存率、TTC染色测量心肌梗死面积、超声评价心功能变化、TUNEL染色检测心肌细胞凋亡等方法评价心肌梗死的治疗效果.②用H2O2建立乳鼠心肌细胞(neonatal rat ventricular myocytes,NRVM)体外损伤模型,观察ADSC-CM对心肌细胞的保护作用.实验分对照组,H2O2+ DMEM/F12组和H2 O2+ ADSC-CM组(n=5).分别用caspase-3 蛋白定量和TUNEL染色检测心肌细胞凋亡.结果 ①相较于DMEM/F12,ADSC-CM显著减少心肌梗死面积[(35.3±0.5%)vs(41.7±1.9%)P <0.05]、提高心功能[EF:(60.4±4.8)%vs(47.2±3.7)%,P<0.05]、减少梗死边缘区心肌细胞凋亡[TUNEL+心肌细胞/106细胞核:(677.4±64.2) vs (867.3±67.9),P<0.05];②相对于DMEM/F12,ADSC-CM明显减少H2O2诱导的心肌细胞凋亡[caspase-3蛋白
作者:杨德忠;王伟;王微;彭玉兰;黄海韵;王元元;郭燕丽;王红勇;曾春雨
来源:第三军医大学学报 2013 年 35卷 9期