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目的 探讨二甲双胍对高糖诱导的肾小管上皮HK-2细胞上皮间质转化(EMT)的影响及其机制.方法 以0、7.5、15.0、30.0、60.0、120.0 mmol/L二甲双胍作用48 h后,采用噻唑蓝(MTT)法检测HK-2细胞活力以筛选合适的二甲双胍作用浓度;将体外培养的HK-2细胞分为对照组(5.5 mmol/L D-葡萄糖)、高渗组(24.5 mmol/L甘露醇和5.5 mmol/L D-葡萄糖)、高糖组(30 mmol/L D-葡萄糖)、高糖+7.5 mmol/L二甲双胍组(30 mmol/L D-葡萄糖+7.5 mmol/L二甲双胍)和高糖+15 mmol/L二甲双胍组(30 mmol/L D-葡萄糖+15 mmol/L二甲双胍),倒置显微镜观察各组HK-2细胞形态,免疫印迹法(Western blotting)检测各组HK-2细胞中α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、E-钙黏附蛋白(E-cadherin)、转化生长因子-β(TGF-β)、细胞外信号调节激酶(ERK)、磷酸化(p)-ERK、基质金属蛋白酶9(MMP-9)蛋白表达水平,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测α-SMA、E-cadherin、TGF-β、ERK、MMP-9 mRNA表达水平.结果 与对照组相比,30.0、60.0 mmol/L二甲双胍作用后HK-2细胞活力明显升高,120.0 mmol/L二甲双胍作用后HK-2细胞活力明显降低(P<0.05),而7.5、15.0 mmol/L二甲双胍作用后HK-2细胞活力差异无统计学意义(P>0.05);与对照组比较,高渗组细胞形态无明显改变,且细胞中α-SMA、E-c

作者:常毅娜;宋白利;张文博;付留俊

来源:现代药物与临床 2021 年 36卷 4期

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作者:
常毅娜;宋白利;张文博;付留俊
来源:
现代药物与临床 2021 年 36卷 4期
标签:
肾小管上皮细胞 高糖 二甲双胍 上皮间质转化 转化生长因子-β/细胞外信号调节激酶/基质金属蛋白酶9通路
目的 探讨二甲双胍对高糖诱导的肾小管上皮HK-2细胞上皮间质转化(EMT)的影响及其机制.方法 以0、7.5、15.0、30.0、60.0、120.0 mmol/L二甲双胍作用48 h后,采用噻唑蓝(MTT)法检测HK-2细胞活力以筛选合适的二甲双胍作用浓度;将体外培养的HK-2细胞分为对照组(5.5 mmol/L D-葡萄糖)、高渗组(24.5 mmol/L甘露醇和5.5 mmol/L D-葡萄糖)、高糖组(30 mmol/L D-葡萄糖)、高糖+7.5 mmol/L二甲双胍组(30 mmol/L D-葡萄糖+7.5 mmol/L二甲双胍)和高糖+15 mmol/L二甲双胍组(30 mmol/L D-葡萄糖+15 mmol/L二甲双胍),倒置显微镜观察各组HK-2细胞形态,免疫印迹法(Western blotting)检测各组HK-2细胞中α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、E-钙黏附蛋白(E-cadherin)、转化生长因子-β(TGF-β)、细胞外信号调节激酶(ERK)、磷酸化(p)-ERK、基质金属蛋白酶9(MMP-9)蛋白表达水平,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测α-SMA、E-cadherin、TGF-β、ERK、MMP-9 mRNA表达水平.结果 与对照组相比,30.0、60.0 mmol/L二甲双胍作用后HK-2细胞活力明显升高,120.0 mmol/L二甲双胍作用后HK-2细胞活力明显降低(P<0.05),而7.5、15.0 mmol/L二甲双胍作用后HK-2细胞活力差异无统计学意义(P>0.05);与对照组比较,高渗组细胞形态无明显改变,且细胞中α-SMA、E-c