目的:探讨纳米载体转染沉默鼻咽癌CNEII细胞中Survivin基因后,CNEII细胞增殖、凋亡及对放疗敏感性的改变。方法:制备聚乙烯亚胺( PEI)-四氧化三铁( Fe3 O4)磁性纳米粒,用PEI-Fe3 O4磁性纳米粒包被miRNA-Survivin质粒(纳米干扰质粒),将CNEII细胞分为空白对照组(不加质粒,C组)、加纳米干扰质粒组( S组)及加miRNA-NC对照质粒组( NC组);3组细胞转染48 h后,荧光显微镜下观察质粒所带绿色荧光蛋白EG-FP的表达,进行细胞计数,计算转染效率;利用Real Time RT-PCR及Western Blot方法检测Survivin mRNA及蛋白表达抑制情况;转染24、48、72及96 h时用MTT法检测3组细胞的增殖情况,转染48 h时用放射线照射3组,采用流式细胞术检测3组细胞放射线照射前后的细胞凋亡率。结果:转染48 h后,加入包被miRNA-Survivin质粒的PEI-Fe3 O4磁性纳米粒的CNEII细胞转染效率为(60.9±3.9)%、mRNA表达抑制率为96.5%、蛋白表达抑制率为82.5%,均高于C组和NC组(P<0.05),说明构建PEI-Fe3O4磁性纳米粒成功;MTT结果显示48 h以后S组细胞的吸光度值低于NC组和C组,说明细胞增殖被抑制;转染48~72 h CNEII细胞施以6Gy的放射线照射,射线照射后S组细胞凋亡率高于S组照射前( P<0.05),S组细胞凋亡率高于NC
作者:邓雯;孙茂钢;赵艳;赵厚育
来源:贵阳医学院学报 2016 年 41卷 4期