目的：对基于 CRISPR/ Cas9系统的猪内皮细胞泛素样含 PHD 和环指域1（UHRF1）定向编辑进行研究，并分析其对单核细胞趋化蛋白-1表达的影响。方法靶向设计并构建 UHRF1基因外显子区域 gRNA 序列载体，并将其与 hCas9载体共转染猪内皮细胞制备单克隆抗体，并分析单核细胞趋化蛋白-1表达变化。结果本研究共获重组质粒5个，转染后获得细胞株 a、细胞株 b 和细胞株 c 三株 UHRF1蛋白表达极低细胞株；UHRF1蛋白敲除后单核细胞趋化蛋白-1和 MMP9、IL1、IL2及 Bax 蛋白表达分析水平明显降低而 Bcl2表达明显升高，且与野生型细胞株相比差异有显著的统计学意义（ P ﹤0.05）。结论成功获得基于 CRISPR/ Cas9系统的猪内皮细胞 UHRF1定向编辑，且获得细胞株内单核细胞趋化蛋白-1表达明显降低。
作者：邱奕雁；朱峰；夏小龙；张小骞；陈扬；杨欣建
来源：临床和实验医学杂志 2016 年 15卷 15期
