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目的 探讨肝素对脂多糖(LPS)刺激人脐静脉内皮细胞(HUVEC)分泌单核细胞趋化蛋白1 (MCP-1)水平以及单核细胞与内皮细胞黏附作用的影响.方法 对HUVEC进行体外培养,取第4~5代用于本次实验.将细胞分成磷酸盐缓冲液(PBS)对照组、肝素对照组、LPS组、肝素+ LPS组.LPS组加入10 mg/L的LPS ;PBS对照组则加入等量PBS ;肝素对照组则加入10 kU/L普通肝素;肝素+ LPS组在进行LPS 刺激前15 min加入10 kU/L的普通肝素.各组于LPS刺激后6 h、12 h收集细胞,通过实时荧光定量反转录-聚合酶链反应(qRT-PCR)测定细胞中MCP-1 mRNA表达;各组预处理后加入荧光染料标记的人单核细胞株THP-1共同避光孵育1 h,在荧光显微镜下观察THP-1与HUVEC的黏附密度.结果 与PBS对照组相比,LPS刺激后6 h和12 h细胞MCP-1 mRNA表达明显增加,6 h达到高峰,然后逐渐降低,但12 h仍明显高于PBS对照组〔2-ΔΔCt:6 h为16.41(15.03,18.00)比1.00(0.80,1.26),12 h为9.27(8.11,9.85)比1.00(0.84,1.20),均P<0.05〕.用肝素预处理可使LPS诱导的MCP-1 mRNA表达明显降低〔2-ΔΔCt :6 h为2.06(1.72,2.46)比16.41(15.03,18.00), 12 h为2.46(2.19,4.56)比9.27(8.11,9.85),均P<0.05〕.肝素对照组MCP-1 mRNA表达与PBS对照组相比差异无统计学意义〔2-ΔΔCt:6 h为1.47(

作者:陈恬璐;马晓春;李旭

来源:中华危重病急救医学 2019 年 31卷 10期

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陈恬璐;马晓春;李旭
来源:
中华危重病急救医学 2019 年 31卷 10期
标签:
肝素 脂多糖 内皮细胞 单核细胞 单核细胞趋化蛋白1 Heparin Lipopolysaccharide Endothelial cell Monocyte Monocyte chemotactic protein-1
目的 探讨肝素对脂多糖(LPS)刺激人脐静脉内皮细胞(HUVEC)分泌单核细胞趋化蛋白1 (MCP-1)水平以及单核细胞与内皮细胞黏附作用的影响.方法 对HUVEC进行体外培养,取第4~5代用于本次实验.将细胞分成磷酸盐缓冲液(PBS)对照组、肝素对照组、LPS组、肝素+ LPS组.LPS组加入10 mg/L的LPS ;PBS对照组则加入等量PBS ;肝素对照组则加入10 kU/L普通肝素;肝素+ LPS组在进行LPS 刺激前15 min加入10 kU/L的普通肝素.各组于LPS刺激后6 h、12 h收集细胞,通过实时荧光定量反转录-聚合酶链反应(qRT-PCR)测定细胞中MCP-1 mRNA表达;各组预处理后加入荧光染料标记的人单核细胞株THP-1共同避光孵育1 h,在荧光显微镜下观察THP-1与HUVEC的黏附密度.结果 与PBS对照组相比,LPS刺激后6 h和12 h细胞MCP-1 mRNA表达明显增加,6 h达到高峰,然后逐渐降低,但12 h仍明显高于PBS对照组〔2-ΔΔCt:6 h为16.41(15.03,18.00)比1.00(0.80,1.26),12 h为9.27(8.11,9.85)比1.00(0.84,1.20),均P<0.05〕.用肝素预处理可使LPS诱导的MCP-1 mRNA表达明显降低〔2-ΔΔCt :6 h为2.06(1.72,2.46)比16.41(15.03,18.00), 12 h为2.46(2.19,4.56)比9.27(8.11,9.85),均P<0.05〕.肝素对照组MCP-1 mRNA表达与PBS对照组相比差异无统计学意义〔2-ΔΔCt:6 h为1.47(