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目的 探讨重组腺病毒介导的热休克蛋白70 (HSP70)表达对低氧-复氧损伤后神经细胞生长的影响.方法 用携带全长HSP70基因的重组腺病毒vAd-HSP70感染体外原代培养的神经细胞,RT-PCR和Wes-tern blotting方法 检测靶细胞中外源性HSP70基因表达.实验分为vAd-HSP70感染组、vAd-GFP感染组和未感染组,3组细胞经低氧-复氧处理后,采用MTT法检测细胞活力,生长曲线检测细胞生长状态,ELISA方法 检测细胞培养上清中乳酸脱氢酶(LDH)活力.结果 RT-PCR和Western blotting均可检测到vAd-HSP70感染组细胞中HSP70表达.低氧-复氧处理后,vAd-HSP70感染组细胞的活力明显高于其他两组(F=10.683,P<0.01);细胞生长曲线显示vAd-HSP70感染组细胞生长良好,细胞数明显高于其他两组(F=21.307~24.105,P<0.01);vAd-HSP70感染组细胞培养上清中LDH活力明显低于其他两组(F=7.492,P<0.01),而vAd-GFP感染组和未感染组LDH活力差异无显著性(P>0.05).结论 重组腺病毒介导的HSP70转染可保护神经细胞生长,从而抵抗低氧-复氧损伤.

作者:杨芳芳;胡丹;时飞;曲彦

来源:青岛大学医学院学报 2011 年 47卷 6期

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作者:
杨芳芳;胡丹;时飞;曲彦
来源:
青岛大学医学院学报 2011 年 47卷 6期
标签:
HSP70热休克蛋白质类 神经元 缺氧 腺病毒科
目的 探讨重组腺病毒介导的热休克蛋白70 (HSP70)表达对低氧-复氧损伤后神经细胞生长的影响.方法 用携带全长HSP70基因的重组腺病毒vAd-HSP70感染体外原代培养的神经细胞,RT-PCR和Wes-tern blotting方法 检测靶细胞中外源性HSP70基因表达.实验分为vAd-HSP70感染组、vAd-GFP感染组和未感染组,3组细胞经低氧-复氧处理后,采用MTT法检测细胞活力,生长曲线检测细胞生长状态,ELISA方法 检测细胞培养上清中乳酸脱氢酶(LDH)活力.结果 RT-PCR和Western blotting均可检测到vAd-HSP70感染组细胞中HSP70表达.低氧-复氧处理后,vAd-HSP70感染组细胞的活力明显高于其他两组(F=10.683,P<0.01);细胞生长曲线显示vAd-HSP70感染组细胞生长良好,细胞数明显高于其他两组(F=21.307~24.105,P<0.01);vAd-HSP70感染组细胞培养上清中LDH活力明显低于其他两组(F=7.492,P<0.01),而vAd-GFP感染组和未感染组LDH活力差异无显著性(P>0.05).结论 重组腺病毒介导的HSP70转染可保护神经细胞生长,从而抵抗低氧-复氧损伤.