目的:本研究针对甲胎蛋白mRNA(AFP mRNA)设计脱氧核酶(DZ),观察其切割AFP mRNA的有效性,探索脱氧核酶在肝癌基因治疗的可能性.方法:体外转录AFP mRNA底物,设计并合成DZ、硫代修饰脱氧核酶(DZs,序列同DZ,但两侧各有两个脱氧核苷酸进行了硫代修饰)、反义寡聚脱氧核苷酸(ASO)、无关DZ对照.体外切割AFP mRNA;经转染试剂将DZ转染入肝癌细胞HepG2,利用RT-PCR法检测AFP mRNA水平的变化;免疫细胞化学及图像分析系统检测AFP蛋白质表达情况;MTT法初步估计肝癌细胞的生长效应.结果:DZ与DZs在体外均可切割AFP mRNA底物,其切割率分别为63.2
作者:初秋;罗速;李旭甡
来源:中华肿瘤防治杂志 2007 年 14卷 24期