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目的 构建核呼吸因子-1(NRF-1)过表达的大鼠心肌细胞,观察缺氧条件下细胞增殖和细胞凋亡的变化.方法 将大鼠心肌细胞H9 C2分为NRF-1过表达组、空载体组和正常对照组,NRF-1过表达组和空载体组分别用NRF-1过表达慢病毒及空载体病毒进行转染,正常对照组不做处理.将三组细胞置于缺氧用三气培养箱中进行缺氧培养(37℃、1%O2+5%CO2+94%N2)24 h.采用实时无标记分析(RTCA)技术观察缺氧6、12、24 h时的细胞增殖水平,流式细胞仪检测缺氧24 h时细胞凋亡率,qRT-PCR法检测缺氧24 h时半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(caspase-3)mRNA的相对表达量.结果 缺氧12、24 h时,NRF-1过表达组细胞增殖水平高于正常对照组和空载体组;缺氧24 h时,与空载体组和正常对照组比较,NRF-1过表达组细胞凋亡水平降低,且caspase-3 mRNA表达水平较低(P均<0.05).结论 NRF-1过表达可以降低缺氧条件下心肌细胞的凋亡,从而提高心肌细胞在缺氧条件下的存活能力.

作者:孙红丽;杨继辉;牛楠;朱明星;赵巍;宋熔

来源:山东医药 2018 年 58卷 26期

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作者:
孙红丽;杨继辉;牛楠;朱明星;赵巍;宋熔
来源:
山东医药 2018 年 58卷 26期
标签:
核呼吸因子-1 缺氧 心肌细胞 细胞增殖 细胞凋亡 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3 大鼠
目的 构建核呼吸因子-1(NRF-1)过表达的大鼠心肌细胞,观察缺氧条件下细胞增殖和细胞凋亡的变化.方法 将大鼠心肌细胞H9 C2分为NRF-1过表达组、空载体组和正常对照组,NRF-1过表达组和空载体组分别用NRF-1过表达慢病毒及空载体病毒进行转染,正常对照组不做处理.将三组细胞置于缺氧用三气培养箱中进行缺氧培养(37℃、1%O2+5%CO2+94%N2)24 h.采用实时无标记分析(RTCA)技术观察缺氧6、12、24 h时的细胞增殖水平,流式细胞仪检测缺氧24 h时细胞凋亡率,qRT-PCR法检测缺氧24 h时半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(caspase-3)mRNA的相对表达量.结果 缺氧12、24 h时,NRF-1过表达组细胞增殖水平高于正常对照组和空载体组;缺氧24 h时,与空载体组和正常对照组比较,NRF-1过表达组细胞凋亡水平降低,且caspase-3 mRNA表达水平较低(P均<0.05).结论 NRF-1过表达可以降低缺氧条件下心肌细胞的凋亡,从而提高心肌细胞在缺氧条件下的存活能力.