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目的 观察微小RNA-20a-5p (miR-20a-5p)靶向调控乳腺癌转移抑制基因1(BRMS1L)对人结直肠癌细胞株SW480增殖、凋亡能力的影响,并探讨其可能机制.方法 取SW480细胞,分别将miR-20a-5p抑制物(anti-miR-20a-5p)、miR-20a-5p抑制物阴性对照(anti-miR-NC)、BRMS1L过表达载体(pcDNA-BRMS1L)、BRMS1L过表达载体阴性对照(pcDNA-NC)、miR-20a-5p模拟物(miR-20a-5p mimics)、miR-20a-5p模拟物阴性对照(miR-NC)转染至细胞中,CCK-8法测算细胞存活率,流式细胞术测算细胞凋亡率,Western blotting法检测细胞周期素D1(CyclinD1)、活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(Cleaved-Caspase-3)、β-catenin蛋白.取SW480细胞,分别将miR-20a-5p mimics、miR-NC与WT-BRMS1L或MUT-BRMS1L共转染至细胞中,采用双荧光素酶报告基因检测系统检测细胞荧光素酶活性;另取SW480细胞,分别将miR-20a-5p mimics、miR-NC、anti-miR-20a-5p、anti-miR-NC分别转染至细胞中,采用Western blotting法检测细胞BRMS1L蛋白.结果 抑制miR-20a-5p表达或过表达pcDNA-BRMS1L,SW480细胞存活率降低,细胞凋亡率升高,CyclinD1蛋白表达降低,Cleaved-Caspase-3蛋白表达升高(P均<0.05);抑制BRMS1L表达部分逆转anti-miR-20a-5p对SW480细胞增殖和凋亡的影响(P均<0.0

作者:陈杰

来源:山东医药 2020 年 60卷 12期

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作者:
陈杰
来源:
山东医药 2020 年 60卷 12期
标签:
微小RNA-20a-5p 乳腺癌转移抑制基因1 结直肠癌 细胞增殖 细胞凋亡 Wnt/β-catenin信号通路
目的 观察微小RNA-20a-5p (miR-20a-5p)靶向调控乳腺癌转移抑制基因1(BRMS1L)对人结直肠癌细胞株SW480增殖、凋亡能力的影响,并探讨其可能机制.方法 取SW480细胞,分别将miR-20a-5p抑制物(anti-miR-20a-5p)、miR-20a-5p抑制物阴性对照(anti-miR-NC)、BRMS1L过表达载体(pcDNA-BRMS1L)、BRMS1L过表达载体阴性对照(pcDNA-NC)、miR-20a-5p模拟物(miR-20a-5p mimics)、miR-20a-5p模拟物阴性对照(miR-NC)转染至细胞中,CCK-8法测算细胞存活率,流式细胞术测算细胞凋亡率,Western blotting法检测细胞周期素D1(CyclinD1)、活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(Cleaved-Caspase-3)、β-catenin蛋白.取SW480细胞,分别将miR-20a-5p mimics、miR-NC与WT-BRMS1L或MUT-BRMS1L共转染至细胞中,采用双荧光素酶报告基因检测系统检测细胞荧光素酶活性;另取SW480细胞,分别将miR-20a-5p mimics、miR-NC、anti-miR-20a-5p、anti-miR-NC分别转染至细胞中,采用Western blotting法检测细胞BRMS1L蛋白.结果 抑制miR-20a-5p表达或过表达pcDNA-BRMS1L,SW480细胞存活率降低,细胞凋亡率升高,CyclinD1蛋白表达降低,Cleaved-Caspase-3蛋白表达升高(P均<0.05);抑制BRMS1L表达部分逆转anti-miR-20a-5p对SW480细胞增殖和凋亡的影响(P均<0.0