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目的:在大肠杆菌中表达经密码了优化的人乳头瘤病毒6型(HPV6)L1的融合蛋白.方法:PCR方法扩增HPV6L1基因,测序及序列比对后,对基因进行密码子优化并合成优化后的基因HPV6 mL1,将其克隆入原核表达载体pGEX4T-1,IPTG诱导融合蛋白在大肠杆菌BE21(DE3)中表达,SDS-PAGE鉴定表达产物.结果:酶切和测序结果证实HPV6 mLl基因的原核表达载体构建正确;以1 mmol/L IPTG于37C诱导4 h,蛋白以包涵体形式表达;表达产物的相对分子质量与预期值一致,为80 000.结论:获得大肠杆菌表达的HPV6 L1蛋白,为其结构功能研究和疫苗研发提供了基础.

作者:刘斌;钱永华;张骞;张万菊;张钫;麻粉莲;郑丽舒

来源:生物技术通讯 2009 年 20卷 4期

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作者:
刘斌;钱永华;张骞;张万菊;张钫;麻粉莲;郑丽舒
来源:
生物技术通讯 2009 年 20卷 4期
标签:
人乳头瘤病毒6型 LI基因 蛋白表达
目的:在大肠杆菌中表达经密码了优化的人乳头瘤病毒6型(HPV6)L1的融合蛋白.方法:PCR方法扩增HPV6L1基因,测序及序列比对后,对基因进行密码子优化并合成优化后的基因HPV6 mL1,将其克隆入原核表达载体pGEX4T-1,IPTG诱导融合蛋白在大肠杆菌BE21(DE3)中表达,SDS-PAGE鉴定表达产物.结果:酶切和测序结果证实HPV6 mLl基因的原核表达载体构建正确;以1 mmol/L IPTG于37C诱导4 h,蛋白以包涵体形式表达;表达产物的相对分子质量与预期值一致,为80 000.结论:获得大肠杆菌表达的HPV6 L1蛋白,为其结构功能研究和疫苗研发提供了基础.