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目的 探讨人脐带间充质干细胞(HUMSCs)向卵巢颗粒细胞(GCs)分化的可行性.方法 通过骨形态发生蛋白4(BMP4)预处理,联合人卵泡液和卵丘GCs诱导HUMSCs向卵巢GCs分化;以人GCs作为对照.免疫荧光法检测HUMSCs诱导分化前和诱导分化12 d卵泡刺激素受体(FSHR)的表达;Real-time PCR检测HUMSCs诱导分化前、后GCs特异性基因FSHR、抗苗勒管激素(AMH)、芳香化酶19A1(CYP19A1)及干细胞多能性相关基因OCT4的表达.结果 诱导前HUMSCs无绿色荧光标记的FSHR表达;诱导分化12 d后,细胞形态与贴壁生长的人GCs相近,可见绿色荧光标记的FSHR表达,但荧光信号弱于阳性对照组;OCT4表达水平显著下调(P<0.001),GCs特异性基因FSHR、AMH和CYP19A1基因表达水平均显著上调(P均<0.001),表明诱导分化后HUMSCs已失去干细胞特性,向GCs定向分化,并具备GCs的部分特性.结论 初步建立了HUMSCs向GCs分化的体外培养体系;HUMSCs在体外可成功诱导分化为GCs样细胞.

作者:李玉;姜宏;殷慧群;杜馨;刘聪慧

来源:中华生殖与避孕杂志 2019 年 39卷 8期

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作者:
李玉;姜宏;殷慧群;杜馨;刘聪慧
来源:
中华生殖与避孕杂志 2019 年 39卷 8期
标签:
人脐带间充质干细胞 颗粒细胞 分化
目的 探讨人脐带间充质干细胞(HUMSCs)向卵巢颗粒细胞(GCs)分化的可行性.方法 通过骨形态发生蛋白4(BMP4)预处理,联合人卵泡液和卵丘GCs诱导HUMSCs向卵巢GCs分化;以人GCs作为对照.免疫荧光法检测HUMSCs诱导分化前和诱导分化12 d卵泡刺激素受体(FSHR)的表达;Real-time PCR检测HUMSCs诱导分化前、后GCs特异性基因FSHR、抗苗勒管激素(AMH)、芳香化酶19A1(CYP19A1)及干细胞多能性相关基因OCT4的表达.结果 诱导前HUMSCs无绿色荧光标记的FSHR表达;诱导分化12 d后,细胞形态与贴壁生长的人GCs相近,可见绿色荧光标记的FSHR表达,但荧光信号弱于阳性对照组;OCT4表达水平显著下调(P<0.001),GCs特异性基因FSHR、AMH和CYP19A1基因表达水平均显著上调(P均<0.001),表明诱导分化后HUMSCs已失去干细胞特性,向GCs定向分化,并具备GCs的部分特性.结论 初步建立了HUMSCs向GCs分化的体外培养体系;HUMSCs在体外可成功诱导分化为GCs样细胞.