目的:检测干细胞基因Nanog在食管癌细胞系TE-1中的表达及其对顺铂敏感性的影响.方法:通过细胞免疫荧光检测食管癌细胞系TE-1中Nanog蛋白的表达；应用Lipofectamine 2000将荧光染料标记的Nanog siRNA转染进细胞中,通过荧光显微镜观察转染效率,再通过逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot检测小干扰RNA (siRNA)的沉默效率；转染后24 h加入顺铂,继续孵育48 h后测得不同转染组的半数抑制浓度(IC50),后加入相同浓度的顺铂5 mg/L,48 h后测得不同转染组的生存率.结果:Nanog蛋白在食管癌细胞系TE-1中高表达,以核表达为主；Nanog siRNA细胞转染率为(67.57±16.90)％,沉默效率可高达85％以上；转染24 h后加入顺铂,继续孵育48 h后测得Nanog siRNA组的IC50较阴性对照组和空白组相比均降低,差异有统计学意义.加入相同浓度顺铂5 mg/L,48 h后测得Nanog siRNA组细胞生存率明显低于阴性对照组和空白对照组,差异有统计学意义.结论:Nanog在食管癌细胞系TE-1中高表达,降低Nanog的表达后能够提高食管癌细胞对顺铂的敏感性.
作者：石磊芝；杜亚明；苏鹏；刘长军；王中彬
来源：天津医药 2012 年 40卷 4期
