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背景:多药耐药一直是遏制提高结肠癌化疗有效性的瓶颈问题.目的:探讨沉默PPARα能否减弱羟喜树碱诱导的人结肠癌细胞凋亡,从而阐明PPARα在羟喜树碱耐药中的潜在作用.方法:构建针对PPARα基因的siRNA干扰载体,并转染人结肠癌SW1116细胞,经G418筛选出稳定转染的细胞,以RT-PCR和蛋白质印迹法验证干扰效果.经羟喜树碱干预后,以MTT法检测细胞增殖,Annexin V-FITC/PI检测细胞凋亡.以定量RT-PCR检测不同浓度miR-506前体转染SW1116细胞后对PPARα下游调控靶基因mRNA表达的影响.结果:siRNA干扰载体Ⅲ的沉默效果最佳,PPARα mRNA和蛋白表达分别下调了约94.1

作者:童锦禄;郑青;徐锡涛;陈翔;朱明明;聂芳;冉志华;萧树东

来源:胃肠病学 2010 年 15卷 5期

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作者:
童锦禄;郑青;徐锡涛;陈翔;朱明明;聂芳;冉志华;萧树东
来源:
胃肠病学 2010 年 15卷 5期
标签:
RNA,小分子干扰 PPARα 羟喜树碱 结肠肿瘤 细胞凋亡
背景:多药耐药一直是遏制提高结肠癌化疗有效性的瓶颈问题.目的:探讨沉默PPARα能否减弱羟喜树碱诱导的人结肠癌细胞凋亡,从而阐明PPARα在羟喜树碱耐药中的潜在作用.方法:构建针对PPARα基因的siRNA干扰载体,并转染人结肠癌SW1116细胞,经G418筛选出稳定转染的细胞,以RT-PCR和蛋白质印迹法验证干扰效果.经羟喜树碱干预后,以MTT法检测细胞增殖,Annexin V-FITC/PI检测细胞凋亡.以定量RT-PCR检测不同浓度miR-506前体转染SW1116细胞后对PPARα下游调控靶基因mRNA表达的影响.结果:siRNA干扰载体Ⅲ的沉默效果最佳,PPARα mRNA和蛋白表达分别下调了约94.1