目的 利用小分子干扰RNA( siRNA)技术抑制人结肠癌SW480细胞人生长激素受体(GHR)基因的表达,观察GHR基因沉默对SW480细胞增殖的影响.方法 设计特异性siRNA,构建针对人GHR真核质粒的表达载体(pcDNATM6.2-GW/EmGFP-siRNA-GHR),用电转染法转染人结肠癌SW480细胞,培养48 ～72 h后,用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞增殖活性；Western Blot检测GHR蛋白表达；实时荧光定量PCR( qPCR)方法检测GHR mRNA水平变化.结果 转染siRNA后,与对照组相比,转染组细胞增殖速率、GHR的蛋白表达量、GHR mRNA水平均明显降低(均P＜0.05).结论 构建的pcDNATM6.2 - GW/EmGFP- GHRsiRNA能有效地下调SW480细胞中GHR的表达,从而抑制SW480细胞的增殖.
作者：周东；张毅；梁道明；袁勇；李思齐；曾德妙；陈嘉勇
来源：中国普通外科杂志 2011 年 20卷 9期
