目的 建立急性心肌梗死早期诊断的血浆microRNAs 检测平台及其定量分析的标准化流程,筛选可作为急性心肌梗死早期诊断潜在标志物的血浆microRNAs.方法 分别收集30例健康者和50例急性心肌梗死患者的血浆,以肝素、EDTA或枸橼酸钠抗凝,常规法或Trizol改良法提取血浆中的RNA,加入外源性线虫microRNA(cel-miR-39)作为标准内参,采用两种qRT-PCR技术(TaqMan探针法和SYBR Green法)分别检测候选microRNAs 的表达量,评价其早期诊断急性心肌梗死的临床价值.结果 与EDTA相比,肝素对血浆候选microRNAs 的qRT-PCR检测存在明显抑制作用(P<0.05);与常规法相比,改良法可明显降低TaqMan 探针法检测候选microRNAs的Ct值(P均<0.05);急性心肌梗死患者血浆miR-1,miR-133b,miR-208a,miR-499的平均表达水平均显著高于对照组(P均<0.05),其中miR-208a和miR-499在胸痛发作2h内即明显升高,二者可作为急性心肌梗死早期诊断的标记物;miR-208a和miR-499联合检测阳性率明显高于单一检测(P<0.05).结论 肝素对血浆microRNAs的检测有抑制作用;Trizol改良法提取血浆microRNAs能有效提高其检出水平;TaqMan探针法对血浆微量microRNAs检测的灵敏度和特异度高于SYBR Green法;联合检测血浆miR-208a和miR-499的表达较单一检测对急性心肌梗死的早期诊

作者：辛金海；姚春霞；丁敏；李小坤；王如美；时志民

来源：现代中西医结合杂志 2017 年 26卷 9期