背景与目的:研究表明,表没食子儿茶素没食子酸酯(epigallocatechin-3-gallate, EGCG)抗肿瘤作用机制尚不十分清楚,本研究旨在观察EGCG调节TNF-α诱导的胃癌SGC-7901细胞核转录因子κB/p65(NF-κB/p65)的入核并发挥诱导凋亡的作用.方法:Hoechst染色法检测EGCG处理SGC-7901细胞前后凋亡的形态学改变;Western blot方法观察EGCG作用前后NF-κB/p65蛋白在胞质内及核内的变化;流式细胞术检测EGCG调节NF-κB/p65入核前后细胞凋亡的变化;DNA ladder方法观察EGCG诱导细胞DNA断裂情况.结果:Hoechst染色法显示EGCG处理后细胞形态改变:核致密浓染或呈碎块状、苍白色.Western blot方法检测发现,10 ng/ml的TNF-α作为NF-κB/p65入核的诱导剂分别作用细胞30、60、90和120 min后,核内NF-κB/p65明显增多并在60 min达高峰;60 μg/ml的EGCG预处理细胞不同时间(0、12、24、36和48 h)后,再以 TNF-α处理60 min,检测发现核内NF-κB/p65明显下降并在24 h达低谷; 不同浓度EGCG(40、60、80和100 μg/ml) 预处理细胞24 h后,再加TNF-α处理60 min,核内NF-κB/p65呈时间依赖性下降.流式细胞术显示,10 ng/ml的TNF-α处理细胞60 min后,细胞凋亡率为3.7
作者:王强;陈晓艳;罗招阳;赵慧
来源:中国癌症杂志 2008 年 18卷 1期