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[目的]探讨银杏素调节核因子E2相关因子2(Nrf2)/溶质载体家族7成员11(SLC7A11)/谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)信号通路对氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的血管内皮细胞铁死亡的影响.[方法]将人脐静脉内皮细胞EA.hy926分为正常对照组(正常培养)、ox-LDL组(50 mg/L ox-LDL)、银杏素低剂量组(50 mg/L ox-LDL+10 μmol/L银杏素)、银杏素中剂量组(50 mg/L ox-LDL+20 μmol/L银杏素)、银杏素高剂量组(50 mg/L ox-LDL+40 μmol/L银杏素)、ML385 组(50 mg/L ox-LDL+40 μmol/L银杏素+1 μmol/L 的 Nrf2 抑制剂 ML385)、Erastin组(50 mg/L ox-LDL+40 μmol/L 银杏素+5 μmol/L 的 SLC7A11 抑制剂 Erastin)、RSL3 组(50 mg/L ox-LDL+40 μmol/L银杏素+0.5 μmol/L的GPX4抑制剂RSL3);MTT法检测细胞存活率;试剂盒检测细胞超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、还原型谷胱甘肽(GSH)水平;特异性荧光探针法检测细胞内铁含量;DCFH-DA荧光探针法和氟硼二吡咯(BODIPYTM)法检测细胞内活性氧(ROS)和脂质ROS水平;Western blot检测细胞Nrf2、SLC7A11、GPX4、4-羟基壬烯酸(4-HNE)、环氧合酶2(COX2)、p53蛋白表达.[结果]与正常对照组相比,ox-LDL组细胞存活率、SOD含量、GSH含量以及Nrf2、SLC7A11、GPX4表达明显降低(P<0.05),MDA含量

作者:韩震海;王飞飞;潘立栋

来源:中国动脉硬化杂志 2023 年 31卷 3期

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作者:
韩震海;王飞飞;潘立栋
来源:
中国动脉硬化杂志 2023 年 31卷 3期
标签:
银杏素 Nrf2/SLC7A11/GPX4通路 血管内皮细胞 铁死亡 氧化型低密度脂蛋白
[目的]探讨银杏素调节核因子E2相关因子2(Nrf2)/溶质载体家族7成员11(SLC7A11)/谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)信号通路对氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的血管内皮细胞铁死亡的影响.[方法]将人脐静脉内皮细胞EA.hy926分为正常对照组(正常培养)、ox-LDL组(50 mg/L ox-LDL)、银杏素低剂量组(50 mg/L ox-LDL+10 μmol/L银杏素)、银杏素中剂量组(50 mg/L ox-LDL+20 μmol/L银杏素)、银杏素高剂量组(50 mg/L ox-LDL+40 μmol/L银杏素)、ML385 组(50 mg/L ox-LDL+40 μmol/L银杏素+1 μmol/L 的 Nrf2 抑制剂 ML385)、Erastin组(50 mg/L ox-LDL+40 μmol/L 银杏素+5 μmol/L 的 SLC7A11 抑制剂 Erastin)、RSL3 组(50 mg/L ox-LDL+40 μmol/L银杏素+0.5 μmol/L的GPX4抑制剂RSL3);MTT法检测细胞存活率;试剂盒检测细胞超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、还原型谷胱甘肽(GSH)水平;特异性荧光探针法检测细胞内铁含量;DCFH-DA荧光探针法和氟硼二吡咯(BODIPYTM)法检测细胞内活性氧(ROS)和脂质ROS水平;Western blot检测细胞Nrf2、SLC7A11、GPX4、4-羟基壬烯酸(4-HNE)、环氧合酶2(COX2)、p53蛋白表达.[结果]与正常对照组相比,ox-LDL组细胞存活率、SOD含量、GSH含量以及Nrf2、SLC7A11、GPX4表达明显降低(P<0.05),MDA含量