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目的:探究microRNA(miR)-124-3p作用于calpain 1抑制氧化应激对脊髓损伤后神经元凋亡的影响及其分子机制.方法:选取成年雄性SD大鼠40只,随机分成A组(miR-124-3p agomir组)、B组(agomir-NC组)、C组(model组)以及D组(sham组),每组10只.构建脊髓损伤模型前1d,采用改良的Sloane法向大鼠的脊髓组织T10段蛛网膜下腔注射miR-124-3p agomir(A组)、agomir-NC(B组)或生理盐水(C组、D组).Allen 法建立脊髓损伤模型,D组行手术处理但不进行脊髓撞击.脊髓损伤术前及术后1d进行Basso-Beai-Bresnehan (BBB)量表评分,qRT-PCR检测术前及术后1d、3d、5d模型大鼠T10段脊髓中miR-124-3p水平.通过TUNEL 染色和Western blot检测脊髓组织神经元细胞凋亡情况以及caspase 3、68KD神经丝蛋白(neurofilament protein,NFP)的表达.利用Elisa试剂盒检测总活性氧(reactive oxygen species,ROS)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)、过氧化氢酶(catalase,CAT)以及超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD).利用Targetscan和双荧光素酶报告实验预测并验证miR-124-3p下游靶点.通过流式细胞术和Western blot检测靶点蛋白对神经元细胞凋亡的影响.结果:A组术后1d的BBB评分(12.57±1.42)明显高于B组(6.31±1.03,P<0.05)和C组(6.18±1.15,P<0.05),A

作者:李昊天;陈凌强;王兵;龚志强;董俊杰;杨晋;赵石好

来源:中国脊柱脊髓杂志 2019 年 29卷 12期

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作者:
李昊天;陈凌强;王兵;龚志强;董俊杰;杨晋;赵石好
来源:
中国脊柱脊髓杂志 2019 年 29卷 12期
标签:
脊髓损伤 miR-124-3p 钙蛋白酶1 神经元凋亡 氧化应激
目的:探究microRNA(miR)-124-3p作用于calpain 1抑制氧化应激对脊髓损伤后神经元凋亡的影响及其分子机制.方法:选取成年雄性SD大鼠40只,随机分成A组(miR-124-3p agomir组)、B组(agomir-NC组)、C组(model组)以及D组(sham组),每组10只.构建脊髓损伤模型前1d,采用改良的Sloane法向大鼠的脊髓组织T10段蛛网膜下腔注射miR-124-3p agomir(A组)、agomir-NC(B组)或生理盐水(C组、D组).Allen 法建立脊髓损伤模型,D组行手术处理但不进行脊髓撞击.脊髓损伤术前及术后1d进行Basso-Beai-Bresnehan (BBB)量表评分,qRT-PCR检测术前及术后1d、3d、5d模型大鼠T10段脊髓中miR-124-3p水平.通过TUNEL 染色和Western blot检测脊髓组织神经元细胞凋亡情况以及caspase 3、68KD神经丝蛋白(neurofilament protein,NFP)的表达.利用Elisa试剂盒检测总活性氧(reactive oxygen species,ROS)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)、过氧化氢酶(catalase,CAT)以及超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD).利用Targetscan和双荧光素酶报告实验预测并验证miR-124-3p下游靶点.通过流式细胞术和Western blot检测靶点蛋白对神经元细胞凋亡的影响.结果:A组术后1d的BBB评分(12.57±1.42)明显高于B组(6.31±1.03,P<0.05)和C组(6.18±1.15,P<0.05),A