目的 探讨miR-146a-5p在人晶状体上皮细胞线粒体损伤中的调控作用,以及miR-146a-5p靶向调控Notch2表达对细胞凋亡的影响.方法 采用实时定量PCR?(qRT-PCR)?检测miR-146a-5p在白内障患者晶状体上皮中的表达.将miR-146a-5p模拟物转染人晶状体上皮细胞系SRA01/04,流式细胞术检测细胞凋亡.Western?blotting检测凋亡相关蛋白caspase?9和caspase?12、线粒体损伤相关蛋白基质金属蛋白酶?(MMP)?-2和MMP-9、细胞色素c的表达.qRT-PCR检测NDUFS8、COX5b和ATP5a1?mRNA的表达.免疫荧光检测活性氧?(ROS)?释放.荧光素酶报告基因实验检测miR-146a-5p和Notch2的3'非翻译区靶向结合.Western?blotting检测Notch2下游蛋白.结果 miR-146a-5p增加了SRA01/04细胞ROS的产生,诱发凋亡.miR-146a-5p过表达通过激活caspase?9,阻断线粒体能量代谢,促进线粒体介导的细胞凋亡.Notch2被确认为miR-146a-5p的靶点.结论 miR-146a-5p通过靶向调控Notch2,促进人晶状体上皮细胞线粒体损伤诱导的细胞凋亡.
作者：武彬；丁雨溪；王静；夏建平；马立威；张劲松
来源：中国医科大学学报 2022 年 51卷 11期
