目的:观察甲状旁腺素(PTH)对体外培养人骨髓间充质干细胞(hMSCs)增殖、分化、干性( stemness )和旁分泌功能的作用。方法采用标准培养基体外培养人骨髓间充质干细胞,并将其分为对照组和PTH干预组,用细胞计数测试和BrdU增殖检测细胞增殖变化。用碱性磷酸酶染色、油红染色、阿利新蓝染色检测细胞分化情况。用Real-time PCR检测hMSCs OCT-4、Nanog、 SOX-2、 CCND1、 C-MYC等基因表达情况。用ELISA方法检测hMSCs培养上清液基质细胞衍生因子-1(SDF-1)、胰岛素样生长因子(IGF-1)、血管内皮生长因子( VEGF)、骨形态发生蛋白2( BMP2)和Angiopoietin1蛋白水平。结果使用10-8 mol/L~10-9 mol/L的PTH干预6 d可明显促进hMSCs增殖( P<0.05), PTH 10-8 mol/L促进成骨、软骨分化,抑制脂肪分化。PTH 10-8 mol/L可明显诱导CCND1和C-MYC基因表达(均P<0.01),抑制OCT-4表达( P<0.01),抑制Nanog和SOX-2等表达(均P<0.05)),升高培养液中SDF-1、 IGF-1、 VEGF、 BMP2和血管生成素1( Angio-poietin 1)蛋白水平(均P<0.05)。结论 PTH能促进hMSCs增殖,调节其分化,但不能维持hMSCs的干性。调节hMSCs的旁分泌功能对局部微环境合成代谢、细胞迁移和血管发生产生影响。
作者:唐雯菁;杜艳萍;洪维;李慧林;程群
来源:中华骨质疏松和骨矿盐疾病杂志 2014 年 1期