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目的:研究靶向RAD18基因的小干扰RNA ( siRNA )对食管鳞癌细胞ECA-109增殖和化疗敏感性的影响。方法:合成针对 RAD18基因的 siRNA ( RAD18-siRNA),通过脂质体将其转染人食管鳞癌ECA-109细胞株,采用荧光定量PCR方法检测ECA-109 RAD18和CyclinD1 mRNA的表达,蛋白质印迹法检测其RAD18和CyclinD1蛋白的表达;应用CCK-8法检测ECA-109细胞的增殖和化疗药物对ECA-109细胞存活率的影响,流式细胞术检测ECA-109细胞周期;采用Pearson检验分析RAD18与CyclinD1基因表达的相关性。结果:与未转染组比较, RAD18-siRNA组RAD18表达明显降低(P<0.05)。 RAD18-siRNA组细胞增殖抑制(P<0.05),G1期细胞数增多,G2/M期细胞数减少(P<0.05)。不同浓度顺铂或5-氟尿嘧啶处理细胞后,两组细胞的存活率均下降(均P<0.05),但RAD18-siRNA组细胞半数抑制浓度较未转染组减少( P<0.05)。在食管鳞癌组织中, RAD18基因mRNA的表达与CyclinD1基因mRNA的表达呈正相关( r=0.478,P<0.01)。结论:下调RAD18表达能够抑制食管鳞癌细胞的增殖,提高其对化疗药物的敏感性;CyclinD1在食管鳞癌中的表达水平可能参与这一过程。

作者:娄鹏荣;孙晓南;周俊东;邹士涛

来源:浙江大学学报(医学版) 2016 年 45卷 4期

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作者:
娄鹏荣;孙晓南;周俊东;邹士涛
来源:
浙江大学学报(医学版) 2016 年 45卷 4期
标签:
食管肿瘤/药物疗法 癌,鳞状细胞/药物疗法 RNA,小分子干扰/治疗应用 基因,肿瘤抑制/治疗应用 细胞增殖/药物作用 细胞周期蛋白D1/药物作用 细胞系,肿瘤 Esophageal neoplasms/drug therapy Carcinoma,squamous cell/drug therapy RNA,small interfering/therapeutic use Genes,tumor suppressor/therapeutic use Cell proliferation/drug effects CyclinD1/drug effects Cell line,tumor
目的:研究靶向RAD18基因的小干扰RNA ( siRNA )对食管鳞癌细胞ECA-109增殖和化疗敏感性的影响。方法:合成针对 RAD18基因的 siRNA ( RAD18-siRNA),通过脂质体将其转染人食管鳞癌ECA-109细胞株,采用荧光定量PCR方法检测ECA-109 RAD18和CyclinD1 mRNA的表达,蛋白质印迹法检测其RAD18和CyclinD1蛋白的表达;应用CCK-8法检测ECA-109细胞的增殖和化疗药物对ECA-109细胞存活率的影响,流式细胞术检测ECA-109细胞周期;采用Pearson检验分析RAD18与CyclinD1基因表达的相关性。结果:与未转染组比较, RAD18-siRNA组RAD18表达明显降低(P<0.05)。 RAD18-siRNA组细胞增殖抑制(P<0.05),G1期细胞数增多,G2/M期细胞数减少(P<0.05)。不同浓度顺铂或5-氟尿嘧啶处理细胞后,两组细胞的存活率均下降(均P<0.05),但RAD18-siRNA组细胞半数抑制浓度较未转染组减少( P<0.05)。在食管鳞癌组织中, RAD18基因mRNA的表达与CyclinD1基因mRNA的表达呈正相关( r=0.478,P<0.01)。结论:下调RAD18表达能够抑制食管鳞癌细胞的增殖,提高其对化疗药物的敏感性;CyclinD1在食管鳞癌中的表达水平可能参与这一过程。